|
1 |
|
00:00:02,800 --> 00:00:05,820 |
|
نبدأ اليوم إن شاء الله بالمعمل الرابع بعنوان |
|
|
|
2 |
|
00:00:05,820 --> 00:00:10,760 |
|
Arabic Colonic Count بنرمز له ACC أو له مصطلح |
|
|
|
3 |
|
00:00:10,760 --> 00:00:14,360 |
|
ثاني Total Viable Count لاحظوا أنا عمالي بأحكي |
|
|
|
4 |
|
00:00:14,360 --> 00:00:19,380 |
|
كلمة Count معناها فيها عدّ الشغلة، فيها عدّ معناها |
|
|
|
5 |
|
00:00:19,380 --> 00:00:21,640 |
|
هي من ضمن الـ food analysis اللي هي الـ quantitative |
|
|
|
6 |
|
00:00:21,640 --> 00:00:26,350 |
|
مش qualitative، Total يعني عدّ جميع أنواع البكتيريا |
|
|
|
7 |
|
00:00:26,350 --> 00:00:30,210 |
|
بغض النظر عن نوعها، طيب بدي أعدّ الكل يعني الـ media |
|
|
|
8 |
|
00:00:30,210 --> 00:00:33,590 |
|
مش هيكون فيها أي inhibitors، فهي الـ media بيسميها |
|
|
|
9 |
|
00:00:33,590 --> 00:00:39,510 |
|
general media، مثال عليها الـ nutrient agar، viable |
|
|
|
10 |
|
00:00:39,510 --> 00:00:43,870 |
|
يعني بكتيريا حية، بكتيريا حية لأن هذه هي اللي هتكون |
|
|
|
11 |
|
00:00:43,870 --> 00:00:47,610 |
|
عندها القدرة إنها تلمّ و تتكثر أو تتضاعف في الـ size |
|
|
|
12 |
|
00:00:47,610 --> 00:00:50,790 |
|
وسيلها multiplication، وتظهر بالنهاية على شكل |
|
|
|
13 |
|
00:00:50,790 --> 00:00:57,740 |
|
كولونية، نبدأ بملخص للمعمل وبعدين هنمشي على الـ |
|
|
|
14 |
|
00:00:57,740 --> 00:01:02,340 |
|
سلايدات، حكينا إنه في عند الـ sample line خط إنتاج |
|
|
|
15 |
|
00:01:02,340 --> 00:01:07,680 |
|
لكل خط إنتاج له lot، والـ lot له lot number، قلنا من |
|
|
|
16 |
|
00:01:07,680 --> 00:01:10,880 |
|
العجينة أو من الـ lot بأخد حاجة اسمها الـ sample |
|
|
|
17 |
|
00:01:10,880 --> 00:01:15,320 |
|
unit، الـ sample unit على الأقل بتكون 100 جرام أو |
|
|
|
18 |
|
00:01:15,320 --> 00:01:18,500 |
|
مل، ليش 100 على الأقل؟ هيتعتبر statistical |
|
|
|
19 |
|
00:01:18,500 --> 00:01:24,000 |
|
significant، من الـ Sample Unit بأخد منه مقدار من 25 |
|
|
|
20 |
|
00:01:24,000 --> 00:01:28,660 |
|
لـ 50 جرام أو مل، سميناها الـ Analytical Unit وهي |
|
|
|
21 |
|
00:01:28,660 --> 00:01:32,440 |
|
هي اللي بشتر عليها في المعمل، اليوم بدنا نعدّي |
|
|
|
22 |
|
00:01:32,440 --> 00:01:38,470 |
|
البكتيريا الموجودة في أي عينة، ممكن نصل لـ، بحكي لي |
|
|
|
23 |
|
00:01:38,470 --> 00:01:42,950 |
|
بمجرد ما تجيني العينة، يستحسن نعملها dilution، نعمل |
|
|
|
24 |
|
00:01:42,950 --> 00:01:47,370 |
|
تخفيف، ليش بدّي أعمل تخفيف للعينة؟ مش إنه أخد العين |
|
|
|
25 |
|
00:01:47,370 --> 00:01:52,190 |
|
مباشرة وأزرعها، لأنه ممكن لو أخدت مباشرة أو زرعتها |
|
|
|
26 |
|
00:01:52,190 --> 00:01:56,190 |
|
هيكون عندي عدد الكولونيات كثير كبير عندي في الطبق |
|
|
|
27 |
|
00:01:56,190 --> 00:02:01,150 |
|
الصعب أنه أنا أعدّه، فإيه الجواب؟ to dilute bacteria |
|
|
|
28 |
|
00:02:01,150 --> 00:02:04,170 |
|
in the sample، مشان أخفف البكتيريا في العينات هي |
|
|
|
29 |
|
00:02:04,170 --> 00:02:08,170 |
|
واحدة الشغلة الثانية to avoid saying لحتى ما يطلع |
|
|
|
30 |
|
00:02:08,170 --> 00:02:14,790 |
|
معي النتيجة to numerous to count TNTC لو طلع العدد |
|
|
|
31 |
|
00:02:14,790 --> 00:02:18,950 |
|
صعب جداً أنه أنا أعدّ أكثر من 250 كولوني في الطبق |
|
|
|
32 |
|
00:02:18,950 --> 00:02:24,810 |
|
بسميها to numerous to count، طيب أنا قلت بدي أخفف |
|
|
|
33 |
|
00:02:24,810 --> 00:02:28,950 |
|
العينة بمجرد ما تصلني بدي أخففها، معناته بحتاج إلى |
|
|
|
34 |
|
00:02:28,950 --> 00:02:34,090 |
|
diluent، شغلات بخفف فيها، عندي ثلاث أنواع لـ diluent |
|
|
|
35 |
|
00:02:34,090 --> 00:02:37,510 |
|
أول شيء الـ normal saline وهذا بدنا نستخدمه بشكل |
|
|
|
36 |
|
00:02:37,510 --> 00:02:41,970 |
|
كبير في ما عملنا، normal saline هو ملح طعام مع |
|
|
|
37 |
|
00:02:41,970 --> 00:02:46,720 |
|
distilled water، هي هيك بس محلول ملح اسمه، التركيز |
|
|
|
38 |
|
00:02:46,720 --> 00:02:52,260 |
|
اللي بيلزمني 85 من 100%، لاحظوا أنه هذا التركيز ما |
|
|
|
39 |
|
00:02:52,260 --> 00:02:56,280 |
|
بعمل shrinking أو swallowing للبكتيريا، ما بيخليها |
|
|
|
40 |
|
00:02:56,280 --> 00:03:01,600 |
|
تتقلص أو أنها تنتفخ، كيف بدي أحضر 85 من 100% normal |
|
|
|
41 |
|
00:03:01,600 --> 00:03:09,420 |
|
saline، على الميزان بأوزن 85 من 100 جرام NaCl بحط |
|
|
|
42 |
|
00:03:09,420 --> 00:03:15,260 |
|
عليها 100 مل distilled water، طيب فيما لو كنت محتاجة إني |
|
|
|
43 |
|
00:03:15,260 --> 00:03:19,340 |
|
أحضر فيه ألف مل distilled water، بحط الألف تحت المية |
|
|
|
44 |
|
00:03:19,340 --> 00:03:23,540 |
|
وطرفين في وسطين وهيك بيصير عندي الـ weight للـ NACL |
|
|
|
45 |
|
00:03:23,540 --> 00:03:28,960 |
|
8.5 جرام، الـ daily wanted الثاني هو الـ peptone |
|
|
|
46 |
|
00:03:28,960 --> 00:03:35,550 |
|
الـ peptone هي البروتينات الصغيرة، النشأات من وين صار |
|
|
|
47 |
|
00:03:35,550 --> 00:03:39,710 |
|
في تكسير جزء للبروتينات، partial hydrolysis of |
|
|
|
48 |
|
00:03:39,710 --> 00:03:44,510 |
|
proteins، بتعطيني peptone، فهي الـ peptone بتكون عندي |
|
|
|
49 |
|
00:03:44,510 --> 00:03:48,950 |
|
على شكل powder، التركيز اللي راح يلزمني من الـ peptone |
|
|
|
50 |
|
00:03:48,950 --> 00:03:55,850 |
|
1 من 10%، كيف بدي أحضر 1 من 10% peptone؟ بقول لي على |
|
|
|
51 |
|
00:03:55,850 --> 00:04:01,710 |
|
الميزان بدي أوزن 1 من 10، 0.1 جرام من الـ |
|
|
|
52 |
|
00:04:01,710 --> 00:04:06,170 |
|
powder بحطها في flask وبحط عليها 100 مل distilled |
|
|
|
53 |
|
00:04:06,170 --> 00:04:10,430 |
|
water، طيب لو بدي أحضر في 1000 مل distilled water |
|
|
|
54 |
|
00:04:10,430 --> 00:04:15,690 |
|
طرفين في وسطين وبطلع معي الـ peptone 1 جرام، الـ |
|
|
|
55 |
|
00:04:15,690 --> 00:04:19,620 |
|
daily wanted third هو الـ peptone saline، هو عبارة عن |
|
|
|
56 |
|
00:04:19,620 --> 00:04:24,360 |
|
peptone زائد normal saline، طب كيف بدي أحضر الـ peptone |
|
|
|
57 |
|
00:04:24,360 --> 00:04:30,240 |
|
saline؟ بحط 0.1 جرام من الـ peptone، 85 من 100 |
|
|
|
58 |
|
00:04:30,240 --> 00:04:34,620 |
|
جرام NaCl، والاتنين بحط عليهم 100 مل distilled water |
|
|
|
59 |
|
00:04:35,230 --> 00:04:39,630 |
|
بأخلط الـ 0.1 مع الـ 85 من 100 بحط عليهم |
|
|
|
60 |
|
00:04:39,630 --> 00:04:44,230 |
|
100 ml distilled water، قلت ليش بحتاج الـ diluent؟ |
|
|
|
61 |
|
00:04:44,230 --> 00:04:47,790 |
|
لأن هي بتعملي تخفيف للـ analytical unit لحتى ما |
|
|
|
62 |
|
00:04:47,790 --> 00:04:51,950 |
|
يطلع معي to numerous to count، لما نرجع للجامعة إن |
|
|
|
63 |
|
00:04:51,950 --> 00:04:54,790 |
|
شاء الله بدّي نشتغل المعمل هذا على عينات الـ yogurt |
|
|
|
64 |
|
00:04:54,790 --> 00:04:59,270 |
|
أو اللبن السائل، بتجيني أو بدي أشتريها من الـ .. |
|
|
|
65 |
|
00:04:59,270 --> 00:05:02,790 |
|
من الـ supermarket، بتكون عندي علبة فيها 100 مل من |
|
|
|
66 |
|
00:05:02,790 --> 00:05:07,470 |
|
الـ yogurt، تمام، 100 مل هي .. هي بمثابة الـ sample |
|
|
|
67 |
|
00:05:07,470 --> 00:05:10,170 |
|
unit، لسه بدي أخد منها الـ analytical unit اللي هي |
|
|
|
68 |
|
00:05:10,170 --> 00:05:15,330 |
|
25 مل، بدنا إياها، قبل اللي أخد الـ 25 ml، قلنا لازم أضمن |
|
|
|
69 |
|
00:05:15,330 --> 00:05:19,350 |
|
هي تكون عينة ممثلة، يعني بدّي أعمل mix للـ Meat Meal |
|
|
|
70 |
|
00:05:19,350 --> 00:05:25,130 |
|
بعملها mix عادي برجها باستخدام تيب معقّم، بسحب 25 ml |
|
|
|
71 |
|
00:05:25,130 --> 00:05:28,210 |
|
من اللي جرت، بحطها في flask مغسول بالماء والصابون |
|
|
|
72 |
|
00:05:28,210 --> 00:05:32,090 |
|
والـ distilled water، أنا هيك صار عندي عينتي لسه |
|
|
|
73 |
|
00:05:32,090 --> 00:05:36,410 |
|
مركزة كده يعني بدي أخففها باستخدام Normal Saline |
|
|
|
74 |
|
00:05:36,410 --> 00:05:42,720 |
|
225 ml Normal Saline، قداش صار عندي التخفيف dilution |
|
|
|
75 |
|
00:05:42,720 --> 00:05:45,480 |
|
بيساوي الـ sample على الـ sample زائد الـ diluent |
|
|
|
76 |
|
00:05:45,480 --> 00:05:52,480 |
|
بيساوي 25 على 25 زائد 225، 1 إلى 10 أو 10 أس سالب 1 |
|
|
|
77 |
|
00:05:54,070 --> 00:05:59,730 |
|
فهيك خففت العينة 1 إلى 10، بقول لي الأفضل نبدأ |
|
|
|
78 |
|
00:05:59,730 --> 00:06:04,250 |
|
بتخفيف 1 إلى 10، بغض النظر عن الكميات يعني قبل |
|
|
|
79 |
|
00:06:04,250 --> 00:06:07,710 |
|
شوية أنا هيني حضرت تخفيف 1 إلى 10 من خلال 25 |
|
|
|
80 |
|
00:06:07,710 --> 00:06:13,170 |
|
sample، 225 من الـ diluent، بقدر كمان إنه أحضر |
|
|
|
81 |
|
00:06:13,170 --> 00:06:17,010 |
|
1 إلى 10 باستخدام 10 sample أو 90 من |
|
|
|
82 |
|
00:06:17,010 --> 00:06:21,830 |
|
الـ diluent، اللي هي بتصير 10 على 10 زائد، بقدر |
|
|
|
83 |
|
00:06:21,830 --> 00:06:27,330 |
|
كمان إنه أحضر 1 إلى 10 من خلال 11 sample و99 من |
|
|
|
84 |
|
00:06:27,330 --> 00:06:31,450 |
|
الـ diluent، فهي أول نقطة إنه بدي أبدأ بتخفيف 1 |
|
|
|
85 |
|
00:06:31,450 --> 00:06:35,070 |
|
إلى 10، النقطة الثانية بيقول لي يفضل إنه أمشي |
|
|
|
86 |
|
00:06:35,070 --> 00:06:39,910 |
|
مضاعفات الـ 10، يعني أول شيء بعمل تخفيف 1 إلى 10 |
|
|
|
87 |
|
00:06:39,910 --> 00:06:44,090 |
|
بعد هيك بعمل serial dilution، تخفيف 10 أس سالب |
|
|
|
88 |
|
00:06:44,090 --> 00:06:47,430 |
|
2 أو 1 إلى 100، 10 أس سالب 3 أو 1 إلى 1000 وهكذا |
|
|
|
89 |
|
00:06:47,430 --> 00:06:53,120 |
|
هكذا، شغلنا بيكون على شكل جروبات، لكل جروب عنده |
|
|
|
90 |
|
00:06:53,120 --> 00:06:56,720 |
|
أربع تيوبات، كل تيوب فيه 9 مل normal saline، |
|
|
|
91 |
|
00:06:56,720 --> 00:06:59,780 |
|
بدي أوحد الـ diluent وبدي أغيّر في محتوى |
|
|
|
92 |
|
00:06:59,780 --> 00:07:03,140 |
|
البكتيريا، فالـ diluent كلهم في كل التيوبات هتكون |
|
|
|
93 |
|
00:07:03,140 --> 00:07:08,310 |
|
عنده واحدة 9 مل، شو بدي أعمل؟ بدي أخد من الـ |
|
|
|
94 |
|
00:07:08,310 --> 00:07:11,910 |
|
flask 1 مل، بدي أحطه على التيوب الأول، التيوب |
|
|
|
95 |
|
00:07:11,910 --> 00:07:15,050 |
|
الأول بأخد منه 1 مل، بحطه على التيوب الثاني، |
|
|
|
96 |
|
00:07:15,050 --> 00:07:17,790 |
|
التيوب الثاني 1 مل على التيوب الثالث وعلى |
|
|
|
97 |
|
00:07:17,790 --> 00:07:21,290 |
|
الرابع، بالآخر فبسحب 1 مل من الرابع أو بكبّه |
|
|
|
98 |
|
00:07:24,250 --> 00:07:29,490 |
|
قلنا إنه للفلاسك تخفيفه 1 إلى 10 بأخد منه 1 |
|
|
|
99 |
|
00:07:29,490 --> 00:07:32,610 |
|
مل بدي أحطه على أول التيوب، كيف بدي أخد الـ 1 مل |
|
|
|
100 |
|
00:07:32,610 --> 00:07:37,030 |
|
بأشيل السلفان عن الفلاسك بعقم الفوهة على اللهب |
|
|
|
101 |
|
00:07:37,030 --> 00:07:42,250 |
|
فبسحب 1 مل باستخدام تيب معقّم، بعقم الفوهة ثاني |
|
|
|
102 |
|
00:07:42,250 --> 00:07:46,270 |
|
أو بسكر بالسلفان، بروح على أول تيوب بافتح عنه |
|
|
|
103 |
|
00:07:46,270 --> 00:07:50,930 |
|
القطن سواب، بعقم، بحط فيه الـ 1 مل، بعقم ثاني و |
|
|
|
104 |
|
00:07:50,930 --> 00:07:56,890 |
|
بسكر، تمام، هيك قداش صار عندي الـ dilution في التيوب |
|
|
|
105 |
|
00:07:56,890 --> 00:08:01,550 |
|
الأول، التيوب الأول لحاله تخفيفه صار 1 مل حطينا |
|
|
|
106 |
|
00:08:01,550 --> 00:08:04,670 |
|
عليه، دي هي الـ sample و9 مل من الـ diluent، صار 1 |
|
|
|
107 |
|
00:08:04,670 --> 00:08:09,390 |
|
على 9، صار 1 إلى 10، بس أنا هاي الـ 1 مل كنت ماخدها |
|
|
|
108 |
|
00:08:09,390 --> 00:08:14,470 |
|
من الـ flask لتخفيفه 1 إلى 10، معناته الـ total |
|
|
|
109 |
|
00:08:14,470 --> 00:08:18,930 |
|
dilution للتيوب رقم 1، تخفيفه في تخفيف التيوب اللي |
|
|
|
110 |
|
00:08:18,930 --> 00:08:24,270 |
|
قبله، 1 إلى 10 في 1 إلى 10، صار تخفيف للـ tube الأول 10 |
|
|
|
111 |
|
00:08:24,270 --> 00:08:29,470 |
|
أس سالب 2، بالـ marker بكتب عليها 10 أس سالب 2، أنا |
|
|
|
112 |
|
00:08:29,470 --> 00:08:35,630 |
|
حطيت 1 مل، تمام، هل بينفع أخد الـ 1 مل مباشرة وأحطه |
|
|
|
113 |
|
00:08:35,630 --> 00:08:40,250 |
|
على الـ tube الثاني؟ طبعاً لا، لازم أعمل mix، بعمل mix |
|
|
|
114 |
|
00:08:40,250 --> 00:08:44,850 |
|
مظبوط باستخدام جهاز اسمه الـ vortex، بحطه على الـ |
|
|
|
115 |
|
00:08:44,850 --> 00:08:49,880 |
|
vortex، بيعمل mix للعينة، بعدين بروح أفتح الـ cotton |
|
|
|
116 |
|
00:08:49,880 --> 00:08:53,860 |
|
swab على الـ tube الأول، بعقم الفوهة، بأخد 1 مل |
|
|
|
117 |
|
00:08:53,860 --> 00:08:58,600 |
|
بعقم ثاني وبسكر، وبروح على الـ tube الثاني بحط |
|
|
|
118 |
|
00:08:58,600 --> 00:09:04,540 |
|
عليه الـ 1 مل، صار عندي الـ volume لـ أول الـ tube صار |
|
|
|
119 |
|
00:09:04,540 --> 00:09:08,040 |
|
فيه بس 9 مل، لأن أنا سحبت منه مل وأديته على الـ |
|
|
|
120 |
|
00:09:08,040 --> 00:09:11,970 |
|
tube الثاني، طيب، التيوب الثاني صار فيه 9 مل من الـ |
|
|
|
121 |
|
00:09:11,970 --> 00:09:15,430 |
|
Normal Saline و1 مل اللي أخدته من التيوب رقم 1، |
|
|
|
122 |
|
00:09:15,430 --> 00:09:20,170 |
|
يعني صار فيه 10 مل، قداش الـ Concentration أو الـ |
|
|
|
123 |
|
00:09:20,170 --> 00:09:24,710 |
|
Dilution، 1 على 9، 1 إلى 10، بس أنا هاي الـ 1 |
|
|
|
124 |
|
00:09:24,710 --> 00:09:29,110 |
|
ماخده من التيوب، تخفيفه 10 أس سالب 2 أصلاً، فبالتالي تخفيف |
|
|
|
125 |
|
00:09:29,110 --> 00:09:33,940 |
|
التيوب الثاني في تخفيف التيوب اللي قبله، صار 1 |
|
|
|
126 |
|
00:09:33,940 --> 00:09:37,160 |
|
إلى 10 في 1 إلى 100، صار تخفيفه 10 أس سالب 3 |
|
|
|
127 |
|
00:09:37,160 --> 00:09:41,200 |
|
أو 1 إلى 1000، فبكتب عليه بالـ marker 1 إلى 1000، بعدين |
|
|
|
128 |
|
00:09:41,200 --> 00:09:43,260 |
|
بروح أخد 1 ml من الـ tube الثاني على الـ tube |
|
|
|
129 |
|
00:09:43,260 --> 00:09:47,740 |
|
الثالث، صار عند الـ volume في الـ tube الثاني صار فيه |
|
|
|
130 |
|
00:09:47,740 --> 00:09:52,360 |
|
شو؟ 9 ml، فبضطر أخد أخد 1 ml بديّه في آخر tube |
|
|
|
131 |
|
00:09:52,360 --> 00:09:55,000 |
|
حيصير عندي إنه 9 ml و1 ml جبناها من الـ |
|
|
|
132 |
|
00:09:55,000 --> 00:09:59,540 |
|
tube الثالث، شو بدي أعمل؟ بعمل mix وبعدين بتخلص من |
|
|
|
133 |
|
00:09:59,540 --> 00:10:05,730 |
|
1 ml، هاي اسمها الـ serial dilution، تخفيف أي |
|
|
|
134 |
|
00:10:05,730 --> 00:10:10,410 |
|
تيوب هو تخفيفه مضروب تخفيف التيوب اللي قبله، بعد |
|
|
|
135 |
|
00:10:10,410 --> 00:10:14,850 |
|
هيك من كل تخفيف بروح أخد 100 microliter أو 0.1 |
|
|
|
136 |
|
00:10:14,850 --> 00:10:20,850 |
|
مل، هي هي وبزرعها على طبق فيه nutrient agar، بتكون |
|
|
|
137 |
|
00:10:20,850 --> 00:10:25,910 |
|
عندي الـ media solid متصلبة وجاهزة، باستخدام tip |
|
|
|
138 |
|
00:10:25,910 --> 00:10:30,470 |
|
معقّم، بأخد 100 micro من كل تيوب وبحطه على الطبق |
|
|
|
139 |
|
00:10:30,470 --> 00:10:34,380 |
|
لقباله، وبكتب بالـ marker 10 أس سالب 2، 10 |
|
|
|
140 |
|
00:10:34,380 --> 00:10:38,180 |
|
أس سالب 3، 10 أس سالب 4، طبعاً بحطه في النص |
|
|
|
141 |
|
00:10:38,180 --> 00:10:41,180 |
|
الـ 100 microliter بحطه في النص، بعدين بروح أجيب ال |
|
|
|
142 |
|
00:10:41,180 --> 00:10:45,560 |
|
spreader أو الـ قلشاب، بعقمه كيف قلنا، بنعقم في |
|
|
|
143 |
|
00:10:45,560 --> 00:10:49,780 |
|
الكحول، وبعدين بمرره على اللهب، بحطه على عينتي، و |
|
|
|
144 |
|
00:10:49,780 --> 00:10:53,040 |
|
بقفرده على الطبق كمان |
|
|
|
145 |
|
00:10:54,680 --> 00:10:59,720 |
|
صار عندي أربع تخفيفات أو أربع تيوبات، كل تيوب فيه |
|
|
|
146 |
|
00:10:59,720 --> 00:11:03,780 |
|
له قبلات على التخفيف اللي له، طب احنا قلنا بنعمل |
|
|
|
147 |
|
00:11:03,780 --> 00:11:08,660 |
|
marker على الـ ... للتيوب على ظهره، بكتب عشرة أقصر |
|
|
|
148 |
|
00:11:08,660 --> 00:11:13,280 |
|
بتنين، عشر أقصر، بتلاتة، تمام، بقى بتركه شوية، بعد فترة |
|
|
|
149 |
|
00:11:13,280 --> 00:11:17,920 |
|
بقلبه بحيث أنه تكون الغطاية لتحت، inverted position |
|
|
|
150 |
|
00:11:17,920 --> 00:11:22,180 |
|
أو بسميها upside down، بقلبه وبحطه في الـ incubator |
|
|
|
151 |
|
00:11:22,180 --> 00:11:28,950 |
|
هو مقلوب، بخليه 24 hour على درجة حرارة 37، طيب ليش |
|
|
|
152 |
|
00:11:28,950 --> 00:11:32,050 |
|
بصبر عليها شوية؟ طب أنا كان بإمكاني أنه أزرع و |
|
|
|
153 |
|
00:11:32,050 --> 00:11:36,450 |
|
أقلبه مباشرة، لو قلبته على طول، فكل اللي أنا حاطيته |
|
|
|
154 |
|
00:11:36,450 --> 00:11:39,690 |
|
أو كل اللي زرعته هينزل تاني على الغطاء، ومعناته مش |
|
|
|
155 |
|
00:11:39,690 --> 00:11:44,650 |
|
راح يتكون عندي كلونيات خالص، احنا قلنا بدي نزرع |
|
|
|
156 |
|
00:11:44,650 --> 00:11:48,030 |
|
اليوم على الـ Nutrient Agar، طيب لو أنا كنت حابة أنه |
|
|
|
157 |
|
00:11:48,030 --> 00:11:51,430 |
|
أنمي نوع واحد من البكتيريا والآخر مثلا الـ staph |
|
|
|
158 |
|
00:11:51,430 --> 00:11:54,220 |
|
aureus، شو اللي راح يختلف عندي في التقنية بتاعت |
|
|
|
159 |
|
00:11:54,220 --> 00:11:58,280 |
|
اليوم؟ راح أعمل تخفيف للعينة عادي جدا باستخدام |
|
|
|
160 |
|
00:11:58,280 --> 00:12:01,420 |
|
Normal Saline، راح أعمل Serial Dilution عادي جدا |
|
|
|
161 |
|
00:12:01,420 --> 00:12:05,170 |
|
عادي جدا، لكن الاختلاف اللي هيكون فقط في الـ Media |
|
|
|
162 |
|
00:12:05,170 --> 00:12:08,750 |
|
في الوسط اللي راح أستخدمه، لإن بستخدم الـ Media حسب |
|
|
|
163 |
|
00:12:08,750 --> 00:12:12,130 |
|
نوع البكتيريا اللي بدي أنميها، فلو بدي أنمي جميع |
|
|
|
164 |
|
00:12:12,130 --> 00:12:14,950 |
|
أنواع البكتيريا، بستخدم General Media، ما فيش فيها |
|
|
|
165 |
|
00:12:14,950 --> 00:12:17,750 |
|
Inhibitors، لو بدي أنمي نوع معين من البكتيريا |
|
|
|
166 |
|
00:12:17,750 --> 00:12:21,090 |
|
بستخدم Media بحيث أنها تعمل Inhibition لأي نوع |
|
|
|
167 |
|
00:12:21,090 --> 00:12:26,010 |
|
ثاني، طيب، ممكن تجينا عينات لحمة، شو بدي أعمل فيها؟ |
|
|
|
168 |
|
00:12:26,010 --> 00:12:29,190 |
|
أو كيف بدي أشتغل عينات اللحمة؟ أولا من ناحية الـ |
|
|
|
169 |
|
00:12:29,190 --> 00:12:31,610 |
|
Sample، you know، أنت بدي أخد من أكثر من مكان، |
|
|
|
170 |
|
00:12:31,610 --> 00:12:38,040 |
|
بعدين؟ بأحطها في الـ «blender» أو الـ «stomacher» |
|
|
|
171 |
|
00:12:38,040 --> 00:12:41,240 |
|
حتى أطحنها من solid إلى liquid، بحط عليها الـ |
|
|
|
172 |
|
00:12:41,240 --> 00:12:46,100 |
|
«diluent»، لكن إلا يعني ما تظل عندي جزيئات كثير |
|
|
|
173 |
|
00:12:46,100 --> 00:12:49,960 |
|
صغيرة، فباجي أزرع منها على الطبق، فبفكر هذه |
|
|
|
174 |
|
00:12:49,960 --> 00:12:52,440 |
|
الجزيئات إنها كولونيات، لكن هي بالأساس بتكون |
|
|
|
175 |
|
00:12:52,440 --> 00:12:56,220 |
|
particles من اللحمة، فهي بيسميها «interfering |
|
|
|
176 |
|
00:12:56,220 --> 00:13:00,450 |
|
particles»، شغلات ممكن تتدخل معي مع عد الكولونيات، كيف |
|
|
|
177 |
|
00:13:00,450 --> 00:13:04,410 |
|
بدي أتخلص منها؟ بقول لي عندي طريقتين لأتخلص من |
|
|
|
178 |
|
00:13:04,410 --> 00:13:08,550 |
|
الـ interfering particles، الطريقة الأولى أن ممكن أعمل |
|
|
|
179 |
|
00:13:08,550 --> 00:13:14,230 |
|
طبقين لكل تخفيف لـ tube، الأول بحط له طبقين، باخد 100 |
|
|
|
180 |
|
00:13:14,230 --> 00:13:18,850 |
|
micro على أول طبق وبزرع، بعدين باخد كمان 100 micro |
|
|
|
181 |
|
00:13:18,850 --> 00:13:21,630 |
|
على الطبق الثاني وبزرع، هم الاثنين تخفيفهم عشرة |
|
|
|
182 |
|
00:13:21,630 --> 00:13:26,590 |
|
أضعاف بإثنين، لكن الاختلاف اللي يصير، في طبق بحطه في |
|
|
|
183 |
|
00:13:26,590 --> 00:13:29,770 |
|
الثلاجة أو طبق بحطه في الـ incubator، احنا عارفين |
|
|
|
184 |
|
00:13:29,770 --> 00:13:32,630 |
|
لو بدنا نمي البكتيريا ونوفر لها الظروف من ناحية |
|
|
|
185 |
|
00:13:32,630 --> 00:13:37,150 |
|
الحرارة، بدي أحطها في الـ incubator، لو حطيت الطبق |
|
|
|
186 |
|
00:13:37,150 --> 00:13:41,390 |
|
في الثلاجة، مش راح تنمو البكتيريا، في الطبق هذه |
|
|
|
187 |
|
00:13:41,390 --> 00:13:45,750 |
|
اللي في الثلاجة، لو لقيت أي شيء على الـ media، |
|
|
|
188 |
|
00:13:45,750 --> 00:13:48,490 |
|
معناته هذه، على الأكيد بدها تكون interfering |
|
|
|
189 |
|
00:13:48,490 --> 00:13:53,450 |
|
particles، لأن البكتيريا ما بتنمو في الثلاجة، تمام؟ |
|
|
|
190 |
|
00:13:54,080 --> 00:13:58,820 |
|
فبروح بحدد مكان الـ interfering particles، حجمها، |
|
|
|
191 |
|
00:13:58,820 --> 00:14:02,480 |
|
عددها وبقارنهم مع الـ plate اللي كان في ال |
|
|
|
192 |
|
00:14:02,480 --> 00:14:07,820 |
|
incubator وبأطرحهم من بعض، الطريقة الثانية ممكن بعد |
|
|
|
193 |
|
00:14:07,820 --> 00:14:11,360 |
|
ما أزرع البكتيريا وأطلعها وأطلعها من الـ incubator |
|
|
|
194 |
|
00:14:11,360 --> 00:14:16,040 |
|
قبل اللي قاعد لسه، شو بعمل؟ بأضيف 2 مل من مادة اسمها |
|
|
|
195 |
|
00:14:16,040 --> 00:14:25,410 |
|
2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride، هي المادة |
|
|
|
196 |
|
00:14:25,410 --> 00:14:29,310 |
|
عندها القدرة إنها ترتبط بالبكتيريا وتلونها للون |
|
|
|
197 |
|
00:14:29,310 --> 00:14:32,930 |
|
أحمر، فباجي عندي هناك في الطبق، بتطلع اللي لونها |
|
|
|
198 |
|
00:14:32,930 --> 00:14:36,650 |
|
أحمر بدها تكون high colonies، فبعدها اللي مش ملونة |
|
|
|
199 |
|
00:14:36,650 --> 00:14:40,330 |
|
هي بدها تكون interfering particles، طيب شو سبب |
|
|
|
200 |
|
00:14:40,330 --> 00:14:45,110 |
|
اللون الأحمر اللي عندها؟ بقول لي الـ TTC تيجي |
|
|
|
201 |
|
00:14:45,110 --> 00:14:50,150 |
|
البكتيريا بتعمل لها reduction، اختزال، بتحولها إلى |
|
|
|
202 |
|
00:14:50,150 --> 00:14:53,670 |
|
مادة اسمها الـ Formazan وهي لونها أحمر، يعني الـ |
|
|
|
203 |
|
00:14:53,670 --> 00:14:58,330 |
|
TTC بيصير لها reduction بوسط البكتيريا بتتحول إلى |
|
|
|
204 |
|
00:14:58,330 --> 00:15:04,470 |
|
Formazan وهي لونها أحمر، لكن في مشكلة بتواجهني لما |
|
|
|
205 |
|
00:15:04,470 --> 00:15:08,090 |
|
أستخدم الـ TTC أنه ما بقدر أستخدم الـ colonies |
|
|
|
206 |
|
00:15:08,090 --> 00:15:13,390 |
|
المعادلة بالـ TTC for isolation and identification |
|
|
|
207 |
|
00:15:13,390 --> 00:15:17,170 |
|
of bacteria، لو عندي نوع بكتيريا وبدي أعرف شو هي |
|
|
|
208 |
|
00:15:17,170 --> 00:15:21,810 |
|
البكتيريا بالضبط، شو اسمها؟ ما بقدر أجري عليها ال |
|
|
|
209 |
|
00:15:21,810 --> 00:15:26,390 |
|
biochemical test، ما بنفع طول ما هي فيها TTC، ما |
|
|
|
210 |
|
00:15:26,390 --> 00:15:30,680 |
|
بنفعليش؟ لأن البكتيريا أو الـ colonies هتكون فقدت |
|
|
|
211 |
|
00:15:30,680 --> 00:15:35,200 |
|
بعضًا من خصائصها وبالتالي هتعطيني نتائج غير صحيحة |
|
|
|
212 |
|
00:15:35,200 --> 00:15:38,060 |
|
فمشان أشتغل الـ biochemical test أو ال |
|
|
|
213 |
|
00:15:38,060 --> 00:15:41,400 |
|
identification بشكل عام، لازم أنها تكون الـ colonies |
|
|
|
214 |
|
00:15:41,400 --> 00:15:45,660 |
|
fresh، مش معالجة خالص، يعني ما فيش عليها أي مادة، هيك |
|
|
|
215 |
|
00:15:45,660 --> 00:15:49,040 |
|
تقريبًا بنكون خلصنا المحاضرة، وحاليًا بدي نمشي على ال |
|
|
|
216 |
|
00:15:49,040 --> 00:15:50,060 |
|
slides، على السريع |
|
|