الان شاء الله بدنا نحكي فيه الفحوصات المستخدمة
للكشف عن الأحماض الأمينية qualitative test of
amino acid بدنا نحكي عن الفحوصات النوعية المستخدمة
للكشف عن الأحماض الأمينية qualitative تعني نوعية
يعني هذه الفحوصات أو النتيجة اللي هتظهر عندي هتكون
عبارة عن positive أو negative يوجد أو لا يوجد
qualitative معناها فحوصات نوعية أو جودة تعطي نتيجة
positive أو negative ظهور لون أو عدم ظهور لون، لا
تعطي رقم في عندنا نوعتان من الفحوصات اللي هو
quantitative testQuantitative معناها كمية تحليل كم
يعني بديطلع عندك كمية أو مقدار يعني هيطلع عندك في
الآخر عدد تركيز بس اللي احنا هنتعرف عليه اليوم هو
qualitative test for amino acid فحوصات نوعية للكشف
عن الأحمض الأمينيةفي البداية نحكي مقدمة عن الأحماض
الأمينية و هذه الأشياء حكيناها في المعمل الماضي
حكينا إن الطعام ينقسم إلى تلاتة إلى carbohydrate و
lipid و protein حكينا ال carbohydrate هو مصدر
الطاقة ال lipid هو مخزن الطاقة و ال protein هو
طاقة الخلايا لبناء الخلايا و للتجد حكيناها المرة
الماضيةبرضه حكينا عن الأحماض الأمينية إنه هي عبارة
عن الوحدة البنائية للبروتين وحكينا إنها بترتبط مع
بعض بـprotein bond حكينا الصيغة العامة للأحماض
الأمينية عبارة عن H وإن كل حمض أمين بيختلف عن
الآخر بال R ال side ال chain حكينا كمان المرة
الماضية إن الأحماض الأمينية
وين بتيجي الرابط اللي بيبتديها؟ بين مجموع كربوكسيل
من حمض أميني ومجموع أمين من حمض أميني آخر يتم نزع
جزء ماء في هذه العملية فسمينا التفاعلات تكون
الرابط اللي بيبتديها بـ Condensation Reaction لأنه
بينتج عنها ماء حكينا على الأطراف بيظل عند Free
Amino Group بنسميها الـ N Terminus و Free Carboxyl
Group سميناها الـ C Terminusهنا كمان إن الأحماض
الأمنية تنقسم حسب المصدر إلى essential و non
-essential ال essential الجسم غير قادر على تصنيعها
يجب توفيرها في الواجبات ال non-essential الجسم
قادر على تصنيحها فمش ضرور تكون موجودة في الواجبات
اليوميةو هنا حكينا أن أبسط حمض أميني هو ال glycine
ليش؟ لأن ال side-chain أو ال R-group هي عبارة عن
طرد هيدروجين فقط و حكينا كمان أن الحمض الأمين
الشاز أو الفريد باختلف عن غيره من الأحماض الأمينية
هو البرولينلأنه ماعندهوش amino group حرة اللي
متصلة في الـ central carbon سمناها primary amino
group في كل الأحماض الأمينية تسمى مجموعة الـ amino
group هي primary amino group أو free alpha amino
group إلا في حالة البرولين تسمى secondary amino
group أو amino group لأنها متصلة بالـ central
carbon من جهة بالـ sided chainمن جهة أخرى حكينا عن
الأحماض الأمنية وتقسيمها حسب ال polarity إلى polar
و non polar
charge و ال charge في منها positive charge و في
منها negative charge فهذه التقسيمة كلها سواء polar
او non polar تعتمد على ال side chain بتطلع على ال
side chain حكينا حكي ان اذا في بس كربون و هيدروجين
بتكون non polar اذا فيها مجموعات قطبية بتكون polar
بتطلع اذا كانت مشحونة بتكون charge و اذا غير
مشحونة بتكون uncharged
حكينا عن هذه الصورة اللي بتقسم للأحماض الأمينية
إلى non-polar و polar ال polar في منها uncharged و
في منها charged و في positive و في negative حكينا
في أحماض أمينية بنسميها aromatic amino acid
aromatic اللي هي بتحتوي في ال side chain على حلقة
بنزين إذا كان في ال side chain في حلقة بنسميها
aromatic amino acid
ويجي نحكي عن حاجة اسمها Ionization Ionization
معناها كيف يتصرف الحمض الأميني في الأوساط
المختلفة، في وسط قاعدي، في وسط حمضي، في neutral،
في اتش، في وسط المتعانيهلجت لو جينا و اتفرج على
المعادلة هاي اللي فوق في الوسط هذا حمض أميني موجود
في وسط متعدد الصيغة العامة لحمض أميني موجود في وسط
متعدد بتكون عدد الشحنات الموجبة بتساوي عدد الشحنات
السالمة ان هنا مكتوب CH2 هو الصيغة العامة للحمض
الأميني Central Carbon و Hydrogen و ال R group هي
عبارة عن ذرة الهيدروجين المعتبرينها هناوانقدش
three plus و COO minus هي الصيغة العامة للحمد
الأميني في الوسط المتعادل تكون الشحنات الموجبة
بتساوي الشحنات السالمةالجهاد الـ net charge بتكون
زيه لو جيت أخدت هذا الحمض الأميني حاطيته في وسط
حمضي وسط حمضي يعني جلالة الـ pH يعني أنه كان فيه
زيادة في أيونات الهيدروجين يعني هذا الوسط مليء بـ
H plus زيادةفالحمض الأمينى دخلته من المتعدل وحطيته
في وسط الحمضي وسط الحمضي فيه زيادة في أيونات
الهيدروجين الجاتمين بده يحتاج الهيدروجين هياخد من
الوسط COO- محتاج الهيدروجين فبتستحب من الوسط
هيدروجين و بتتشبع ب CRCOOHفبتصير CH2 COOH NH3 Plus
بصير الشكل العام له CH2 COOH NH3 Plus فأخذ ذرة
هيدروجيني صارت النت تشارج عليه positive chargeاللي
موجودة في المعادلة على اليسار هذا اللي هو الصيغة
العامة الحمض الأميني في وسط حمضي CH2COHNH3Plus
إنه الكربوكسيل أخدت أيون هيدروجين أو بروتون
هيدروجين من الوسط الحمضي اللي هي فيه فصارت COH نت
تشارج في الوسط الحمضي صارتPositive charge طبعا لو
أخدتها الوسط من الوسط المتعدد وحطته في وسط قاعدي
الوسط القاعدي مليء بـ OH- وسط بيكون مليء بـ OH- OH
- هي تحتاج إلى ذرة هيدروجين عشان تتكون جزئنا
فبتروح على أي ذر جزية بتنزع منه هيدروجين عشان
تتكوننا من عندنا بنقدر ننزع منه هيدروجين لأن اتش 3
plusتاخد منه هيدروجين فبصير NH2 COO minus هتتغير؟
لأ مش هتتغير فالوسط المتعدل CH2 NH3 plus COO minus
لما يروح على القاعدة اللي هي على اليمين بيصير NH2
و COO minus اتغيرت من الـ NH3 نزعنا منها هيدروجين
و صارت NH2الـ net charge إيه لو بيكون minus ففي
حالة الوسط الحمضي .. في حالة وسط متعادل ال net
charge بتكون zero فحالة وسط حمضي بيكون ال net
charge positive في حالة الوسط القاعدي ال net
charge negativeهلجد؟ الحمض الأميني اللي بتكون
متساوي عليه الشحنات الموجبة و الشحنات السالبة و ال
net charge بتكون بتساوي zero بسميه Zwitterion
Zwitterion هو الحمض الأميني اللي تتساوي عليه
الشحنة الموجبة و الشحنة السالبة يعني الشحنة الكلية
تكون صفر وين موجود ال Zwitterion؟ في الوسط
المتعادل كان موجودبالوسط المتعدل الحمض الأميني
بيكون الشحن الموجبة بتساوي الشحن السالي يعني الشحن
الكلية بتساوي سفر وهذا بسميه Zwitterion Zwitterion
هو الحمض الأميني الذي تتساوي عليه الشحن الموجبة
والشحن السالي وندت شهر Zeroعند الوسط المتعادل هذا،
عند تكون الحمض الأميني اللي بتكون شحنات الموجبة
السالبة بتساوي الموجبة، في حاجة بنتسميها
isoelectric point أو الـ PR الـ PI أو الـ
isoelectric point هي قيمة BH بتتساوي عند الشحن
الموجبة والسالبة على سطح الحمض الأمينيوبالتالي،
شحنة الكلية صفر قيمة BH تتساوى عندها شحنة الموجبة
والسالبة على سطح الحمض الأمين وبالتالي، شحنة
الكلية بتساوي صفر هاي الـ Isoelectric point،
الإفتصار بـI تمام، في حاجة بنسميها protonated
معناها إنه اكتساب بروتون أو H plus في حاجة بنسميها
Deprotonated يعني فقد بروتوناللي بياخد H plus يعني
في الوسط الحمض زي COO minus اكتسبت H فهذه gain of
البروتون يعني صارلها protonated Deprotonated يعني
loss of البروتون زي الـ NH3 plus في الوسط القاعدة
لما حضيتها صارت NH2 نزعت منها H فبسميها .. بقول
عنها نصارلها Deprotonated فقدت البروتون
هنا بيحكيلي أن الـ Isoelectric point أو الـ PI هي
قيمة BH اللي بيكون فيها الانيونك بتساوي الكاتيونك
النت تشارج بتكون Zero كل حمض أميني له PI أو
Isoelectric point بتختلف عن غيره حسب شو؟ حسب ال
side chain فهو حاكي أن كل حمض أميني بيميزه عن غيره
side chain
نحكي في الجزء العملي للمعمل الأول جزء العملي بيحكي
عن qualitative test for amino acid بحوصات جودة
لالكشف عن الأحماض الأمينية النتيجة عندنا هتكون
positive أو negative«ظهور لون» أو «عدم ظهور لون»
في عندنا number of tests to detect the presence of
amino acid هذه الفحوصات الكاشف عن الأحمان الأمينية
largely depend on the nature of sided chain علشان
بيعتمدوا على الـsided chain لأنه حكي أن البيميز
حمض أمين عن الآخر هو الـsided chain الجد احنا
الفحوصات اللي هنشتغلها بيطلع معنا لون يتغير أو
مايتغيرهذا اللون له شدة intensity of color شدة
اللون هي بتكون تختلف يعني ممكن هو يتلون بس على
درجات من حاجة لتانية تكون درجة بتختلف شدة اللون هي
علشان بتعتمد بتعتمد على أول شي number of reacting
unit number of reacting unit اللي هي ال reacting
unit هي عبارة عن المادة الفعالةقداش عدد المادة
الفعالة الموجودة؟ إيش هي المادة الفعالة؟ دي الاشي
اللي بدور عليها الفحص أنا بشتغل فحص مثلا بيدور على
peptide bond إذا موجودة ال peptide bond، يعطيني
لون إذا مش موجودة، مش هيتغير اللون طب ال peptide
bond هذي ممكن تكون بس رابطتين، ويعطيني لون ممكن
تكون تلاتة ويعطيني لون بس هل اللون هيكون نفسه إذا
كانوا تنتين وإذا كانوا تلاتة؟ شدة اللون هتختلف
بناء على number of reacting unitالحاجة التانية
اللي بتعتمد عليها شدة اللون هي الـ accessibility
to reaction هل هذه المادة الفعالة الـ acting unit
قريبة من التفاعل، هل هي حرة، free، بتقدر تيجي
ترتبط، تشتغل مع التفاعل، مع الـ agent اللي أنا
حطيته، تشتغل و تتغير اللون، ولا إنها مشغولة، مش
هتقدر في حواجز، مش هتقدر تيجي ترتبطهي بتسميها
accessibility to reaction إذا تشدت اللون تعتمد على
حاشتين على ال number of reacting unit وعلى
accessibility to reaction إيش
هي الفحصات اللي هنستخدمها للكشف عن الأحماض
الأمينية؟ هنا فحص اسمه ninhydrin test for 3-alpha
amino groupعلى Free Alpha Amino Group إذا موجودة
بيتغير اللون وبيعطى positive إذا مش موجودة مش
هيتغير اللون فالـ Free Alpha Amino Group هاي
بسميها الـ Reacting Unit فحص التاني اسمه Bio-Red
Test بتدور على ال-peptide bond لإنه فحص ال
-xanthoproteic testZanto Proteic Test for Aromatic
Amino Acid لأ
الأحماض الأمنية اللي تحتوي على حلقة بنزين نشطة
نضيف هنا Activated Aromatic Amino Acidهنا فحص اسمه
hopkincol أو glycosilic acid reaction اللي هو اسمه
hopkincol، glycosilic acid reaction بيدور على الـ
Indole group الـ melons test for amino acid
containing hydroxylفينال جروب للفينول جروب الأمينو
أسد اللي بيحتوي على فينول جروب ساكيجوشي test for
ليجوانيديام جروب لليجوانيديام جروب ليد سالفايت
test بيدور على ال self-hydraile group للحمض الأمين
اللي يحتوي على self-hydraile group هو اللي هيعطيني
positive غير هيك مش هيعطيني positive
نجي نحكي عن أول فحص، أول فحص هو الـ Nenhedrine الـ
Nenhedrine إيش ال objective للفحص، إيش الهدف من
الفحص؟ to detect the presence of free alpha amino
group، بيدور على الـ free alpha amino group إذا
موجود free alpha amino group، هيتغير اللون،
بيعطيني لون بارد، في حالات اللي موجودة في free
alpha amino groupمين عنده free alpha amino group؟
إذا ذاكرين الحمض الأميني، أيش الصيغة العامة له؟
تكون من center carbon ومن الهيدروجينة ومن ال side
chain ومن carboxyl group ومن amino group amino
group هاي سميناها primary amino group أو alpha
amino group معادة في حالة البرولين سميناها amino
groupيعني الأحماض الأمينية كلها تحتوي على free
alpha amino group ما عدا لبرولين عنده amino group
يعني مين هيعطيني positive مع هذا الفحص لو أنا
اشتغلت مجموعة أحماض أمينية على هذا الفحص؟ كلهم
هيعطوني positive لأنهم كلهم بيحتوي على free alpha
amino group تمام؟طيب، إذا ال objective to detect
the presence of free alpha amino group هل موجود
free alpha amino group أو لا؟ إذا تغير اللغة يعني
موجود، إذا ما تغيرش يعني مش موجود طيب إيش ال
principle؟ مبتدأ العمل للفحص؟ كيف يشتغل الفحص؟ ال
principle لو نعملها على نظام معادلات بيسهل عليه
كيف هذا الفحص له ال principle؟ إنه عندنا amino
acid أنا بضيف حمض أميني، بضيف عليه نينهيدرينرياشا
إيش بيعمل ال