1 00:00:00,000 --> 00:00:05,560 الـ Coli Lair Test نفس الـ membrane filter test 2 00:00:05,560 --> 00:00:10,300 هذا بيكشف أو بيستخدم عينات الـ water اللي بدي يصير 3 00:00:10,300 --> 00:00:14,880 أنه بيجيلي الـ Coli Lair Test على شكل kit ال kit 4 00:00:14,880 --> 00:00:18,520 هذا بيكون فيه ال nutrients أو بيكون فيه reagents 5 00:00:18,520 --> 00:00:22,540 مغاديات و reagents ال reagents اللي فيه واحد اسمه 6 00:00:22,540 --> 00:00:28,640 Mug هذا بستعمله لأكشف عن الاشيريشا كولايكيف؟ بكون 7 00:00:28,640 --> 00:00:33,540 عندي عينة ال water و بيكون فيه مع الكات بيكون فيه 8 00:00:33,540 --> 00:00:37,500 بكات لا nutrient ولا reagent بروح أفتح البكات بحط 9 00:00:37,500 --> 00:00:44,100 فيه ال Mug بخليه incubation 24 ساعة و بعد هيك بروح 10 00:00:44,100 --> 00:00:49,080 أعرض العينة لال UV لو صار اللون fluorescent معناته 11 00:00:49,080 --> 00:00:54,100 موجود بالعينة الشريشا كولاي ال reagent التاني اسمه 12 00:00:54,100 --> 00:01:00,820 ONBGبنستعمل للكشف عن الـ Total Coliform بيكون فيه 13 00:01:00,820 --> 00:01:07,540 عينة للواتر بحط فيه المغاديات ورئيس ONBG بعمله 14 00:01:07,540 --> 00:01:12,200 incubation 24 ساعة وبعد هيك بلاحظ هل لون الميه 15 00:01:12,200 --> 00:01:17,120 اتغير إلى أصفر أو لا لو اتغير معناته الموجود هو 16 00:01:17,120 --> 00:01:24,140 Total Coliform الـ Colored يعتبر qualitative not 17 00:01:24,140 --> 00:01:28,690 quantitativeيعني بقوللي هل موجود total coliform أو 18 00:01:28,690 --> 00:01:32,410 لا موجود الشريشة كولاي في العينة أو لا لكن قداش ال 19 00:01:32,410 --> 00:01:36,950 concentration اللي لهم ما بنقدر نعرف use to detect 20 00:01:36,950 --> 00:01:40,310 total coliform and الشريشة كولاي شو بعمل add 21 00:01:40,310 --> 00:01:43,570 bucket of salt and nutrients to water sample 22 00:01:43,570 --> 00:01:47,950 وبعدين أعملهم incubation 24 hour total coliform 23 00:01:47,950 --> 00:01:54,440 بخشف عليها من خلال إضافة ال ONBG reagentفلو كان 24 00:01:54,440 --> 00:01:58,260 موجود total coliform في العينة بتطلع البكتيريا هاي 25 00:01:58,260 --> 00:02:02,980 انزيم اسمه beta-galactosidase بيجي هاد الانزيم 26 00:02:02,980 --> 00:02:07,460 بيشتغل على الرئيسة اللي اسمه ONBG بيحولوا إلى مادة 27 00:02:07,460 --> 00:02:12,360 اسمها الـ Nitrophenol لونها yellow فمجرد ظهور 28 00:02:12,360 --> 00:02:14,980 اللون ال yellow بعد 24 ساعة من ال incubation 29 00:02:14,980 --> 00:02:20,020 معناته موجودة total coliform طيب كيف بدكشف على 30 00:02:20,020 --> 00:02:26,410 وجود الاشريشيا coli بروح أضيف ال Mugتمام، لو 31 00:02:26,410 --> 00:02:32,110 الموجود أشريشا كولاي هتطلع Glucurinase أنزايم بيجي 32 00:02:32,110 --> 00:02:36,450 هذا الأنزيم بيشتغل على الـMUG بيحوله إلى molecule 33 00:02:36,450 --> 00:02:41,690 that fluoresces under UV هيصير وميض تحت الـUV 34 00:02:41,690 --> 00:02:46,190 light لكن مشكلة الـquery layer test أنه ما بقدر 35 00:02:46,190 --> 00:02:49,650 يكشف عن طولة الـstrains من الأشريشا كولاي اللي 36 00:02:49,650 --> 00:02:54,370 بتشمل كمان ال pathogenic strainsأحنا قلنا 37 00:02:54,370 --> 00:02:59,270 الكوليليرد موجود إنه على شكل كيت الـ kit بيكون فيه 38 00:02:59,270 --> 00:03:03,470 بكتات لـ nutrient لالـ reagent حاليًا قد طوروا ال 39 00:03:03,470 --> 00:03:07,410 test had فصاروا يعملوا ال media سواء كانت ال broth 40 00:03:07,410 --> 00:03:12,430 أو الagar من ضمن مكونات الميديا الـ ONBG و الـ MUG 41 00:03:12,430 --> 00:03:17,050 الكوليليرد بيكشف عن الكوليفروم الإشاري شاكولاي 42 00:03:17,050 --> 00:03:20,930 اللي موجودة في المياه العذبة الـ freshwater لكن 43 00:03:20,930 --> 00:03:24,280 عملوا كوليليرد 18هذه بيكشف عن الكليرفوروم 44 00:03:24,280 --> 00:03:27,200 الاشريشيكولاي اللي موجودة فيه ال marine waters في 45 00:03:27,200 --> 00:03:32,960 المياه المالحة احنا قلنا الكليرت فحص qualitative 46 00:03:32,960 --> 00:03:39,640 فطوروا عدلوا صار quantitative test كيف بيستخدعوا 47 00:03:39,640 --> 00:03:45,040 حاجة اسمها quantitative ال quantitative هي زي 48 00:03:45,040 --> 00:03:50,500 الصينية اللي عندكم في الرسمة هاي بيكون فيها ولات 49 00:03:51,920 --> 00:03:56,440 الفكرة بيكون عندي ال water sample بعملها التخفيفات 50 00:03:56,440 --> 00:04:00,040 اللازمة بعد هيك على كل تخفيف بدي أضيف ال reagent و 51 00:04:00,040 --> 00:04:05,200 بعمل mix من كل تخفيف بروح أخد و بحط على الول الأول 52 00:04:05,200 --> 00:04:09,100 من الول التاني فبعمل تخفيف على الول اللي بعده و من 53 00:04:09,100 --> 00:04:13,440 اللي بعده و هكذا بعد هيك بعملهم incubation 24 ساعة 54 00:04:13,440 --> 00:04:18,100 على درجة حالة 37 و بروح أشوف إيش اللون اللي راح 55 00:04:18,100 --> 00:04:24,870 يتغير فيهاللون أصفر و بروح أعد اللون الأصفر اللي 56 00:04:24,870 --> 00:04:28,890 طلع عندى في ال quantity ال tray و بروح لجدول بقوله 57 00:04:28,890 --> 00:04:32,850 لو طلع معي عدد الولات اللي اتغيرت انه هلقات بعدين 58 00:04:32,850 --> 00:04:36,270 انه كام بطلع ال concentration من الجدول بعرف قداش 59 00:04:36,270 --> 00:04:41,250 ال concentration للبكتيريا فال «analyte» ل«cool 60 00:04:41,250 --> 00:04:43,690 alert» إيش المقصود بال «analyte»؟ يعني الإشي اللي 61 00:04:43,690 --> 00:04:47,170 أنا بدور عليه ال «cool alert» بيبحث عن ال «total 62 00:04:47,170 --> 00:04:50,810 coliform» عن الإشتريك الشيكولاينطيب الـ time to 63 00:04:50,810 --> 00:04:53,710 result قدش بحتاج الـ time لتطلع نتيجة يعني قدش 64 00:04:53,710 --> 00:04:59,370 بحتاج ال incubation بحتاج 24 hour النتائج لو طلع 65 00:04:59,370 --> 00:05:05,390 colorless معناته negative إن العينة مافيش فيها إش 66 00:05:05,390 --> 00:05:10,470 لو طلع لون أصفر بعد 24 ساعة معناته موجود total 67 00:05:10,470 --> 00:05:14,770 coliform لو عرضتها إلى ال UV و طلع fluorescent 68 00:05:14,770 --> 00:05:20,370 معناته موجودة الجريشك والعينزي ما قلنا فيه الـ 69 00:05:20,370 --> 00:05:24,450 Koli Laird بيكشف عن الـ Koli Form و الشريشة Koli 70 00:05:24,450 --> 00:05:28,890 عن الانتيرو Laird اسمها محة تكشف عن الانتيرو ككس 71 00:05:28,890 --> 00:05:36,210 فكيف فكرة ال test هات؟ بيكون عندي عينة المي اللي 72 00:05:36,210 --> 00:05:41,570 هي water sample بحط عليها ال reagent و بعدين بشوف 73 00:05:41,570 --> 00:05:46,860 اللون اتغير او لألو صار fluorescence معناته موجود 74 00:05:46,860 --> 00:05:50,580 انتروكوكس بغض النظر عن ال speech سواء انتروكوكس 75 00:05:50,580 --> 00:05:55,660 فاسيام او فكالس لو not fluorescence ما صار تغيير 76 00:05:55,660 --> 00:05:59,800 في اللون يعني لما عرضته ل ال UV معناته الموجود not 77 00:05:59,800 --> 00:06:05,340 انتروكوكس يعني عند العينة انها negative فالانترو 78 00:06:05,340 --> 00:06:08,340 layer 3 agent is used for detection of 79 00:06:08,340 --> 00:06:12,080 enterococcus bacteria such as انتروكوكس فاسيام و 80 00:06:12,080 --> 00:06:17,330 انتروكوكس فكالسسواء كان بالـ fresh or marine water 81 00:06:17,330 --> 00:06:21,310 ليه بعد و هاد مش لازمنا؟ إيش ال .. إيش ال analyte 82 00:06:21,310 --> 00:06:23,350 في الـ interolayer test؟ analyte يعني الأشي اللي 83 00:06:23,350 --> 00:06:26,250 بدور عليه قلنا هاد فقط بيكشف عن الـ intero .. ال 84 00:06:26,250 --> 00:06:29,490 interococcus طيب، قداش بحتاج إلى time أو ال 85 00:06:29,490 --> 00:06:34,210 incubation 24 ساعة؟ لو طلع معي fluorescent معناته 86 00:06:34,210 --> 00:06:37,990 interococcus لو non-fluorescence معناته negative 87 00:06:37,990 --> 00:06:44,630 بعرضها إلى الـ UV lightهذا كان الـ interior layer 88 00:06:44,630 --> 00:06:50,630 بالأول qualitative يعني موجود أو مش موجود بعد هيك 89 00:06:50,630 --> 00:06:54,590 طوروه فصار quantitative من خلال الـ quantitree 90 00:06:54,590 --> 00:06:59,730 باعد قداش اللي اتغير لونهم بروح لجدول و بشوف ال 91 00:06:59,730 --> 00:07:03,830 concentration اللي لهم بس في معلومة مهمة بقوللي 92 00:07:03,830 --> 00:07:07,210 انه لو بدي أتعامل مع ال UV بدي ألبس ال Anti-UV 93 00:07:07,210 --> 00:07:12,670 glasses or goggles الجدول هي اللي قلنا عليها 94 00:07:14,040 --> 00:07:19,960 بالنسبة للـ Basic steps من جمع العينات إلى تفسير 95 00:07:19,960 --> 00:07:25,020 النتاج Collection أو Collecting samples بيصير جمع 96 00:07:25,020 --> 00:07:29,540 للعينات بواسط الـ Collector بعدين بيصير فيه 97 00:07:29,540 --> 00:07:33,140 Transporting samples نقل للعينات حسب الظروف اللي 98 00:07:33,140 --> 00:07:36,500 كانت موجودة فيها Delivering samples لما تصلني على 99 00:07:36,500 --> 00:07:40,620 المختبر أما بشتغلها مباشرة أن هذا هو الأفضل أو أنه 100 00:07:40,620 --> 00:07:45,690 بخزنها لعند ما أفضللكن التخزين بدي يكون صح لا بـ 101 00:07:45,690 --> 00:07:48,830 preparation كيف بدي أجهز المعمل؟ يعني إيش المقصود 102 00:07:48,830 --> 00:07:52,370 فيها؟ إنه بدي أعقم المكان اللي بدي أشتغل عليه؟ إنه 103 00:07:52,370 --> 00:07:56,570 مثلا بدي أحضر الـ media اللي بتلزمني؟ طيب الـ 104 00:07:56,570 --> 00:08:00,130 preparing sample عينتي لو كانت مثلا liquid بدي 105 00:08:00,130 --> 00:08:03,350 أعملها mix or shaking لو كانت سورية بدي أعملها 106 00:08:03,350 --> 00:08:06,310 باستخدام ال blender أو ال stomacher لحد انها تكون 107 00:08:06,310 --> 00:08:13,090 عند عندي عينة homogeneousincubating sample، 108 00:08:13,090 --> 00:08:15,930 reading sample، disposing sample خلاص، بقى اتخلص 109 00:08:15,930 --> 00:08:19,110 منها بالنهاية بالنسبة للـ Data Management والـ 110 00:08:19,110 --> 00:08:23,210 Data Interpretation هي تفسير النتائج، بقولّي إنه 111 00:08:23,210 --> 00:08:26,390 هذه الأشياء مش شغلنا، إحنا شغلنا بس، يعني إحنا 112 00:08:26,390 --> 00:08:29,010 مسؤولين، بدنا نطلّق الـ concentration اللي 113 00:08:29,010 --> 00:08:33,470 بيحكيلنا إنه التركيز مناسب أو لا مقارنة مع الـ 114 00:08:33,470 --> 00:08:37,570 standard هي الجهات المسؤولة، هذا مش شغلي أنا طيب، 115 00:08:37,570 --> 00:08:41,280 شو بحتاج إلى مواد ولا equipment؟بيبتون water 116 00:08:41,280 --> 00:08:45,680 بأستخدمه كـ diluent هي الـ normal saline والبيبتون 117 00:08:45,680 --> 00:08:49,760 saline هي كلها diluent بنخفف العينات فيها، بنخفف 118 00:08:49,760 --> 00:08:52,780 البكتيريا في العينة عشان ما نحكي two numerous to 119 00:08:52,780 --> 00:08:57,880 count Sodium citrate هذا شو بالزمنه؟ Sodium 120 00:08:57,880 --> 00:09:03,580 citrate بتركيز 2% يستخدم ك emulsifying agent مارع 121 00:09:03,580 --> 00:09:06,800 علينا لما قلنا لما يكون عند ال food فيه نسبة فات 122 00:09:06,800 --> 00:09:11,710 كتيرةفبدي أدوب كل المحتويات اللي بالعينة بستخدم 123 00:09:11,710 --> 00:09:15,170 الـ Multifying agent Sodium Citrate بس قبل اللي 124 00:09:15,170 --> 00:09:18,510 أستخدمه لازم أعمله الـ Pre-Warming على درجة حرق 125 00:09:18,510 --> 00:09:22,630 خمسة واربعين سيليزياس Layers of Sulphated Reptose 126 00:09:22,630 --> 00:09:26,190 Broth قلنا هي الـ Media Broth تُعتبر Screening 127 00:09:26,190 --> 00:09:30,870 Test أو Pre-Sumptive وبأستخدمها لـ Total Coliform 128 00:09:30,870 --> 00:09:37,440 Media فيها Lactose لكن مافيها pH Indicatorكيف بقدر 129 00:09:37,440 --> 00:09:41,060 أعرف إن البكتيريا عملت fermentation لللكتوز أو لا 130 00:09:41,060 --> 00:09:45,980 من خلال خروج للغاز باستخدام الدرهم الـ tube الـ 131 00:09:45,980 --> 00:09:51,320 Brilliant Green Lactose 2% بالبروث نفس الأشي ميديا 132 00:09:51,320 --> 00:09:59,040 فيها لكتوز لكن فيها لون فهي confirmatory test 133 00:09:59,040 --> 00:10:03,380 للكوليفار الشريشة Koli Brothهيقولنا عليها 134 00:10:03,380 --> 00:10:09,540 confirmatory test لـ «الفيكل كوليفارب» ممكن يكون 135 00:10:09,540 --> 00:10:13,080 أيضًا فيه شريش شاكولاي بروث with MUG أحنا قلنا قبل 136 00:10:13,080 --> 00:10:19,840 شوية أنه الـ «كولي» ليرت فيه two reagent «ONBG» 137 00:10:19,840 --> 00:10:23,980 و«MUG» وصار حاليًا أنه بيستخدموا الـ «reagent» 138 00:10:23,980 --> 00:10:26,700 هدوة اللي بيحطوهم على الـ media سواء كانت البروث 139 00:10:26,700 --> 00:10:34,560 أو كانت أجارأيوزين ميثيلين بلو أو Endogar قلنا 140 00:10:34,560 --> 00:10:38,740 الإيوزين ميثيلين بلو فيها صبغتين لو اللي نمت عندي 141 00:10:38,740 --> 00:10:42,540 شريشة كولاي هتعمل a might bond بين الصبغتين 142 00:10:42,540 --> 00:10:45,820 وبالتالي هيصير اللي هونها green metallic sheen طيب 143 00:10:45,820 --> 00:10:49,120 لو كان اللي نامي عندي هي ال enterobacter هتعمل 144 00:10:49,120 --> 00:10:52,120 precipitate عشان لأ الصبغات هي في منتصف الكلونز 145 00:10:52,120 --> 00:10:57,320 وبالتالي هيطلع شكلها ال fish eye ال Endogar قلنا 146 00:10:57,320 --> 00:11:01,500 high differential mediaشو فيها؟ فيها لكتوز و فيها 147 00:11:01,500 --> 00:11:08,060 فوكسين داي فبتنمي الكوليفورم وبتميزها من خلال الـ 148 00:11:08,060 --> 00:11:12,260 dark red with metallic gold sheen اللي هو الأحمر 149 00:11:12,260 --> 00:11:15,880 غامق ما فيها بيكون فيه لمعة اللي ماكن كأجار high 150 00:11:15,880 --> 00:11:20,540 media بتنمي لجرام negative بتشوف إذا البكتيريا عمل 151 00:11:20,540 --> 00:11:25,920 fermentation لأ لكتوز أو لألـ Nutrient Agar أو Non 152 00:11:25,920 --> 00:11:28,940 -Selective Agar قولنا هاي الـ General Media ما 153 00:11:28,940 --> 00:11:32,700 فيها Inhibitors ليش بستخدم الـ Nutrient Agar 154 00:11:32,700 --> 00:11:35,700 بإضافة إنها بتنمي جميع أنواع الـ Microorganism 155 00:11:35,700 --> 00:11:41,120 برضه بستخدمها في حالة الـ Biochemical Test إحنا 156 00:11:41,120 --> 00:11:44,500 قولنا لو كانت الـ Colonies بستخدم عليها الـ TTC 157 00:11:44,500 --> 00:11:49,220 Trifluent Tetrazolamachloride هذا الأشي راح تغير 158 00:11:49,220 --> 00:11:52,780 من خصائص البكتيريا وبالتالي مش راح تظبط أنه 159 00:11:52,780 --> 00:11:56,640 أستخدمهاللـ biochemical test بدي أستخدم البكتيريا 160 00:11:56,640 --> 00:12:00,580 لل biochemical test لازم تكون fresh و نامية فقط 161 00:12:00,580 --> 00:12:04,380 على الـ nutrient agar أو أي ميديا non-selective 162 00:12:04,380 --> 00:12:09,480 الـ water bath بقولّي water level should be above 163 00:12:09,480 --> 00:12:16,360 the medium in immersed tube لازم أن المي تكون 164 00:12:16,360 --> 00:12:20,340 غامرة العينة في ال water bath مشان يصير توزيع درجة 165 00:12:20,340 --> 00:12:24,330 الحرارة بشكل متجنسالـ Thermometer بستخدمه لأقيس 166 00:12:24,330 --> 00:12:28,570 درجات الحرارة الـ Stomacher أو البلندر بستخدم لطحن 167 00:12:28,570 --> 00:12:30,910 الطعام السترد بتحوله لليكود لحتى أنه يصير 168 00:12:30,910 --> 00:12:35,310 homogenous في عندي حاجة اسمها الـ Control cultures 169 00:12:35,310 --> 00:12:41,110 بستخدمه ATCC culture or equivalent شو هي ال ATCC؟ 170 00:12:41,110 --> 00:12:46,370 هي American Type Culture Collection هي عبارة عن 171 00:12:46,370 --> 00:12:51,860 مؤسسة بتجيب عينات الcontrolات علىالمعامل وبيتوزحها 172 00:12:51,860 --> 00:12:56,980 على البلدان طيب شو السبب؟ بقول ليه مثلا لو .. لو 173 00:12:56,980 --> 00:13:01,300 إجي حد اشتغل على عينة إشاريشا كولاي وطلعت معاه 174 00:13:01,300 --> 00:13:09,220 positive مع فحص معين إجي حد تاني اشتغل من طبق تاني 175 00:13:09,220 --> 00:13:13,060 برضه هذا الطبق مكتوب عليه إشاريشا كولاي واشتغل نفس 176 00:13:13,060 --> 00:13:17,300 الفحص لكن طلعت معاه النتيجة negative طب مع أن 177 00:13:17,300 --> 00:13:21,400 الأثنين كانوا نفس الإشاريشا يعنينفس الاسم 178 00:13:21,400 --> 00:13:25,260 Escherichia coli ونفس الفحص لكن الاختلاف كان يعني 179 00:13:25,260 --> 00:13:28,100 كل واحد منطبق طب يعني وين المشكلة بدها تكون؟ 180 00:13:28,100 --> 00:13:31,860 المشكلة بتكون أن Escherichia coli المستخدمة كانت 181 00:13:31,860 --> 00:13:36,380 من strains مختلفة، من سلالات مختلفة طيب حكوا بدنا 182 00:13:36,380 --> 00:13:41,060 نحل هاي المشكلة فبدنا نعطي البكتيريا اللي أشتغلنا 183 00:13:41,060 --> 00:13:46,160 عليها بنعطيها أرقام و بنوزحها كcontrolات على بلدان 184 00:13:46,160 --> 00:13:50,710 العالمفالبكتيريا اللي إحنا ابتجيلنا على المعمل 185 00:13:50,710 --> 00:13:55,290 بتكون جاية من برا يعني بتكون بكتيريا بتكون مستوردة 186 00:13:55,290 --> 00:14:01,750 فابتجيلها على شكل كريستالات بلاستيك بنحلها على 187 00:14:01,750 --> 00:14:06,750 الطبق بطريقة معينة أسباب المثال كان عندي بكتيريا 188 00:14:06,750 --> 00:14:12,890 الشريشة كولاي الـATCC لإلها 4 3 2 1 4 3 2 1 هذا هو 189 00:14:12,890 --> 00:14:19,010 رقم الـstrains لإلها فلازم هاي البكتيريابتطلع نفس 190 00:14:19,010 --> 00:14:22,830 النتيجة في كل بلدان العالم لهذا النوع من الـ 191 00:14:22,830 --> 00:14:27,690 strains كل واحد اشتغل على هذا الـ strain بفحص معين 192 00:14:27,690 --> 00:14:34,330 لازم الكل يتطابقوا بنفس النتيجة بالنسبة للـ 193 00:14:34,330 --> 00:14:39,150 positive control عسب المثال الشريشة كلها بتطلع 194 00:14:39,150 --> 00:14:44,610 جهاز ع درجة حرارة 44.5 أو 45اللي انكبتوا 24 ساعة 195 00:14:44,610 --> 00:14:47,630 لإنه كل هاي يعتبر من الفيكا الكوليفورم هاي اللي 196 00:14:47,630 --> 00:14:50,830 فيها أربعات كمان عندها القدرة إنها تعمل 197 00:14:50,830 --> 00:14:54,550 fermentation للاكتوز بتطلع أسد و بيتجاز كمان على 198 00:14:54,550 --> 00:15:00,030 الـ EMP Green Metallic Sheen لو استخدمت الإشاريشا 199 00:15:00,030 --> 00:15:06,430 كولاي MUG broth كمان عندها القدرة إنها اتحول للون 200 00:15:06,430 --> 00:15:11,090 أصفر أو لون fluorescent معناته موجودة الإشاريشا 201 00:15:11,090 --> 00:15:15,790 كولايبالنسبة لـ MVEC في الإشاريش كولاي بيكون 202 00:15:15,790 --> 00:15:19,390 Positive Positive Negative Negative بالنسبة للـ 203 00:15:19,390 --> 00:15:21,410 Negative Control استخدموا الـ Enterobacter 204 00:15:21,410 --> 00:15:26,370 Aerogenes هذه البكتيريا على الـ EMP طبعاً بتطلع 205 00:15:26,370 --> 00:15:32,870 Fish Eye بالنسبة لـ Indol هتكون عكس الإشاريش كولاي 206 00:15:33,300 --> 00:15:36,540 بقولنا الشريشة positive positive negative negative 207 00:15:36,540 --> 00:15:39,380 الـ Antibiotic هتكون negative negative positive 208 00:15:39,380 --> 00:15:44,720 positive الـ MPN broths المقصود فيها اللي هي الـ 209 00:15:44,720 --> 00:15:52,320 LST الـ BGLP و الـ ACE broth لاحظوا إن السلمونيلا 210 00:15:52,320 --> 00:15:58,330 طبعا ال ميديات هاي بيكون فيها lactoseالسلمونيلا هي 211 00:15:58,330 --> 00:16:01,150 من ضمن الـ enterobacteriasi لكن non-lactose 212 00:16:01,150 --> 00:16:04,310 fermenter بالتالي مش راح يطلع معها جاز لهيك حكوا 213 00:16:04,310 --> 00:16:08,070 إن السلمونيلا تعتبر negative من ناحية الـ MPN 214 00:16:08,070 --> 00:16:15,730 growth gas negative in MPN growth بالـ EC growth 215 00:16:15,730 --> 00:16:20,490 طب ليش ما استخدموا الـ Enterobacter aerogenesis ك 216 00:16:20,490 --> 00:16:27,260 MPN growth negative control قالوا إنهبعض السلالات 217 00:16:27,260 --> 00:16:28,480 من الـ NT-robacter 218 00:16:28,480 --> 00:16:49,480 aerogenesis 219 00:16:56,010 --> 00:17:02,970 باستخدام NaCl باستخدام HCl و NaOH طيب لو بحتاج 220 00:17:02,970 --> 00:17:06,870 شغلات ك confirmatory بنلجأ ل ال biochemical test 221 00:17:06,870 --> 00:17:12,470 اللي هي بنستخدم ال MVC فلتريبتون، هاد لتريبتون 222 00:17:12,470 --> 00:17:20,170 بيعتبر reagent لل Indol كيف بعرف أنه صار positive 223 00:17:20,170 --> 00:17:27,060 أنه بتطلع رنج لونها أحمر؟فالاشريشيا كلها بالنسبة 224 00:17:27,060 --> 00:17:30,540 لـ MVIC كانت positive positive negative negative 225 00:17:30,540 --> 00:17:33,640 لأن تربع أكتر negative negative positive positive 226 00:17:33,640 --> 00:17:37,720 كمان ممكن نلجأ لل rapid identification kit زي مثلا 227 00:17:37,720 --> 00:17:45,170 باستخدام ال ABI وهي Analytical Profile Indexبيكون 228 00:17:45,170 --> 00:17:51,090 فيها أنابيب صغيرة كتير بتكشف عن الـ 20 فحص بنفس 229 00:17:51,090 --> 00:17:57,490 العينة بوزحها على الـ 20 well من ضمن هذه الفحصات 230 00:17:57,490 --> 00:18:02,310 بتكشف عن الـ ONBG قولنا هذه متخصصة بالكشف عن الـ 231 00:18:02,310 --> 00:18:06,230 Total Coliform كمان في كمان لـ LVDK اللي يعتبر 232 00:18:06,230 --> 00:18:10,210 Automated Test وكمان في شغلات تانية كـ 233 00:18:10,210 --> 00:18:15,830 Coliformatoryبالنسبة لطريقة التعامل مع أي عينة 234 00:18:15,830 --> 00:18:19,310 each sample unit may be analyzed individually طبعا 235 00:18:19,310 --> 00:18:24,890 كل عينة بيتعامل معاها بشكل مستقل وعلى انفراد كمان 236 00:18:24,890 --> 00:18:29,550 شو بدي أعمل أنه أول ما تيجيلي العينة بدي أحافظ 237 00:18:29,550 --> 00:18:32,810 عليها على ال room temperature معاها العينة المجمدة 238 00:18:32,810 --> 00:18:38,530 والمتلجة العينة المجمدة بحافظ عليها في الظروف اللي 239 00:18:38,530 --> 00:18:43,150 كانت موجودة فيهابحطها في ice بيكون درجة الحارة أقل 240 00:18:43,150 --> 00:18:48,350 من zero لم تلاجة بحطها في ظروف من 2 ل 5 لو بدي 241 00:18:48,350 --> 00:18:54,710 أسيح العينات المجمدة بنزلها على التلاجة لو مستعجلة 242 00:18:54,710 --> 00:19:00,070 عليها على ال water bath في درجة لا تزيد عن 45 ومدة 243 00:19:00,070 --> 00:19:04,760 لا تزيد عن ربع الساعةالمفترض إنه analyze sample 244 00:19:04,760 --> 00:19:07,240 unit as soon as possible after they're received in 245 00:19:07,240 --> 00:19:10,960 the laboratory بالنسبة لـShellfish اللي هي المحار 246 00:19:10,960 --> 00:19:16,220 أو القواقع لازم نشتغلها بسرعة لمدة 24 ساعة بعد 247 00:19:16,220 --> 00:19:22,440 جمعها مانفعش إنه انخزنها لإنه بعد هيك بتتلف ال 248 00:19:22,440 --> 00:19:26,600 preparation for analysis استيرال بيبتون water بدي 249 00:19:26,600 --> 00:19:31,240 أعقم بدي أحضر ال diligent بعد هيك بدي أعقبهفحطه 250 00:19:31,240 --> 00:19:35,440 بالـ autoclave أclean the surface of working area 251 00:19:35,440 --> 00:19:37,800 ودي استخدم الـ disinfectant وبيحقم المكان اللي بدي 252 00:19:37,800 --> 00:19:41,860 أشتغل عليه بعد هيك بدي أحضر الـ ST broth قلنا هي 253 00:19:41,860 --> 00:19:48,440 ميديا فيها لكتوز لكن مافيها pH indicator بالنسبة 254 00:19:48,440 --> 00:19:51,700 لـtypical growth result observed for EC broth 255 00:19:51,700 --> 00:19:55,820 بالنسبة للإشريشا كولايا broth كيف بدي أعرف إنه صار 256 00:19:55,820 --> 00:20:01,790 فيه نمو أول حاجةطالما هي عندي الـ Growth معناته 257 00:20:01,790 --> 00:20:06,990 بدي ألاحظ من خلال العقارة، هاي واحد تاني شغلة 258 00:20:06,990 --> 00:20:11,750 بلاحظ من خلال استخدام الدرهم، الـ tube و بقى أشوف 259 00:20:11,750 --> 00:20:18,030 إذا اتكون فيها غاز أو لأ فبنتطلع على تخفيف عشرة 260 00:20:18,030 --> 00:20:23,250 أقل سالب ستة كلهم Clear معناته Zero يعني ولا واحدة 261 00:20:23,250 --> 00:20:28,560 فيها نمو عشرة أقل سالب خمسة Clear كلهم برضهمعناته 262 00:20:28,560 --> 00:20:32,260 و لو واحدة فيها نو فـ0 بدي يكون عشر أقل سالب أربعة 263 00:20:32,260 --> 00:20:37,280 في turbidity في اتنين و level نص high clear فبدي 264 00:20:37,280 --> 00:20:41,980 أكتب اتنين عشر أقل سالب تلاتة التلاتة فيهم 265 00:20:41,980 --> 00:20:45,540 turbidity عشر أقل سالب اتنين التلاتة فيهم كمان 266 00:20:45,540 --> 00:20:48,920 turbidity فالرقم اللي طلع معي ابتدائي من أعلى 267 00:20:48,920 --> 00:20:53,240 تخفيف إلى أقل تخفيف تلاتة تلاتة اتنين زيرو زيرو 268 00:20:54,390 --> 00:20:59,630 برجع للجدول و باخد الرقم هاد و بشوف ضمن الجدول مين 269 00:20:59,630 --> 00:21:03,570 هي اللي بيكون فيها خمس تخفيفات كل تخفيف قيلو تلت 270 00:21:03,570 --> 00:21:08,190 اتيوبات كم قيلو ال concentration هاد هي طريقة ال 271 00:21:08,190 --> 00:21:12,570 NPN شوفت الاتيوبات اللي عندي يعني مثلا عشرة و 272 00:21:12,570 --> 00:21:15,530 أسالب اتنين اعملناله تلت اتيوبات عشرة و أسالب تلت 273 00:21:15,530 --> 00:21:18,570 اعملناله برضه كمان تلت اتيوبات عشرة و أسالب أربع و 274 00:21:18,570 --> 00:21:22,090 هكذا بشوف قداش في عندي ال turbidity و بامشي 275 00:21:22,090 --> 00:21:25,770 بالترتيبمن 10 أس 3 ب2 ل 10 أس 3 ب3 قدش فيهم ال 276 00:21:25,770 --> 00:21:31,650 durability فبكتب الرقم طلب معايا 33200 باخد الرقم 277 00:21:31,650 --> 00:21:36,670 هات فروح أدور فيه الجدول في خانة أكم من تخفيف 278 00:21:36,670 --> 00:21:41,690 بختار عن رقم 5 لإن أنا هيني عاملة عن خمس تخفيفات 279 00:21:41,690 --> 00:21:45,330 من 10 أس 3 ب2 ل 10 أس 3 ب6بعد هيك بدور على عدد 280 00:21:45,330 --> 00:21:49,010 التيوبات لكل تخفيف أنا حاط تلات تخفيفة، أنا حاط 281 00:21:49,010 --> 00:21:53,030 تلات تيوبات ممكن أحط أربعة، ممكن خمسة فبدور في ال 282 00:21:53,030 --> 00:21:57,810 gradual وين خمس تخفيفات وإلو تلات تيوبات وبطلع 283 00:21:57,810 --> 00:22:02,270 معايا الـ concentration لإلهم وهذه طريقة الـ NPN 284 00:22:02,270 --> 00:22:06,790 اللي راح نستخدم ان شاء الله في المعمل القادم لملة 285 00:22:06,790 --> 00:22:10,860 هاد هو لـ EMP أيوزين ميثاين إبلوملون لما يكون 286 00:22:10,860 --> 00:22:14,400 green متالكشين معناته اللي نمت عندي هي الاشريشيا 287 00:22:14,400 --> 00:22:19,440 كولاي لما يكون ال colors في النص فيها اشي غامق، 288 00:22:19,440 --> 00:22:23,840 dark، purple، شكل ال fish eye معناته high 289 00:22:23,840 --> 00:22:29,740 enterobacter ال EMB is a primer لـ differential 290 00:22:29,740 --> 00:22:35,220 medium هي بتميز بين الاشريشيا كولاي وبين الأنواع 291 00:22:35,220 --> 00:22:38,820 التانية اللي راح تنمو على الطبقHowever, it does 292 00:22:38,820 --> 00:22:42,300 inhibit the growth of some gram-positive bacteria 293 00:22:42,300 --> 00:22:46,040 طالما هي بتعمل inhibition لبعض من ال gram-positive 294 00:22:46,040 --> 00:22:49,620 بكتيريا أو بتنمي لجرام نيجاتيف معناته برضه كمان 295 00:22:49,620 --> 00:22:55,300 selective agent EMB is selective media EMB is used 296 00:22:55,300 --> 00:22:58,220 to differentiate between enteric lactose fermenter 297 00:22:58,220 --> 00:23:01,440 and non-lactose fermenter ال EMB بتميز بين 298 00:23:01,440 --> 00:23:03,420 الكوليفور والنون الكوليفور 299 00:23:05,980 --> 00:23:10,180 وبشكل خاص هي بتميز الاشريشيا كلها من خلال الـgreen 300 00:23:10,180 --> 00:23:14,460 metallication يوزين مثلين بلو أجار contain فيها 301 00:23:14,460 --> 00:23:19,220 بيبتون وهذا كمصدر للتخذية، فيها لاكتوز، بتميز 302 00:23:19,220 --> 00:23:21,620 البكتير اللي بتعمل lactose fermenter and non 303 00:23:21,620 --> 00:23:27,180 -lactose fermenter الصبغات اللي فيها تستخدم 304 00:23:27,180 --> 00:23:33,220 لـinhibition لـgram positiveفالـ Selective agent 305 00:23:33,220 --> 00:23:38,360 هي الصبغة اللي بيبتغل اللكتوز كـ differential 306 00:23:38,360 --> 00:23:42,640 agent دي sugars provide fermentable substrate to 307 00:23:42,640 --> 00:23:45,800 encourage growth of fecal coliform الصبغة بتعمل 308 00:23:45,800 --> 00:23:49,800 inhibition لليجرام positive organism لما بتعمل 309 00:23:49,800 --> 00:23:55,760 fermentation هيطلع منها ال acid وبالتالي هيطلع لون 310 00:23:55,760 --> 00:24:00,980 dark purple بشبه ال fish eyeThe use of methane 311 00:24:00,980 --> 00:24:05,260 blue dyes cause lactose fermenters to have pink 312 00:24:05,260 --> 00:24:09,500 colonies إذا كانت lactose fermenter هيكون لون 313 00:24:09,500 --> 00:24:14,060 الكونية لونها pink الشريشة يقلعي incorporate so 314 00:24:14,060 --> 00:24:18,680 much of the dye يعني بتعمل peptide bond لصبغات مع 315 00:24:18,680 --> 00:24:21,600 بعض precipitated in the cell and give the colonies 316 00:24:21,600 --> 00:24:25,480 a metallic green sheen non-lactose fermenter اللي 317 00:24:25,480 --> 00:24:29,590 مابتعمل fermentation لأ اللاكتوز حضلهالونها هيكون 318 00:24:29,590 --> 00:24:32,430 شو colorless or take on the color of the meat أو 319 00:24:32,430 --> 00:24:36,650 هتاخد لون ال media نفسه زي مين السلمونيلا هي من 320 00:24:36,650 --> 00:24:40,830 ضمن ال bacteria سلاكلها Lactose fermenter 321 00:24:40,830 --> 00:24:45,270 السلمونيلا زي ما قلنا انها بتعمل food poisoning 322 00:24:45,270 --> 00:24:49,450 this media is used to confirm the presence of 323 00:24:49,450 --> 00:24:52,330 Escherichia coli in water sample contaminated with 324 00:24:52,330 --> 00:24:56,760 sewage or fecal materialهي نقدر نعرف من خلالها إنه 325 00:24:56,760 --> 00:24:59,240 هاي إشريشيا كولاي لكن برضه كمان بنحاجة إن إحنا 326 00:24:59,240 --> 00:25:03,740 نتأكد من خلال الـ Biochemical Test you will use 327 00:25:03,740 --> 00:25:06,900 this agar again with the water sampling experiment 328 00:25:06,900 --> 00:25:09,160 to differentiate between إشريشيا كولاي and 329 00:25:09,160 --> 00:25:13,700 Enterobacter لو بدي أميز نمط الإشريشيا كولاي أو 330 00:25:13,700 --> 00:25:17,620 الـ Enterobacter فيه العينة من خلال الـ EMP 331 00:25:17,620 --> 00:25:21,760 الإشريشيا كولاي الـ Green Metallic Sheet و الـ 332 00:25:21,760 --> 00:25:25,470 Enterobacter شكلها بيكون الـ Fish EyeThe dark 333 00:25:25,470 --> 00:25:29,190 cholinase produced on ENP agar is a result of the 334 00:25:29,190 --> 00:25:31,630 acid produced during lactose fermentation 335 00:25:31,630 --> 00:25:37,570 precipitating the dyes in the media الشريشة 336 00:25:37,570 --> 00:25:41,570 كولاي بتعمل بـpeptide bondor amide bond بين 337 00:25:41,570 --> 00:25:46,790 الصبغتين و بيصير لون أخضر لإن تيلوباكتر إيروجينيز 338 00:25:46,790 --> 00:25:51,730 هيكون لونها غامق و هي هترسب الصبغات في منتصف 339 00:25:51,730 --> 00:25:59,390 الكلونز البروتيز هي هتنمو على الطبق لكنها ما بتعمل 340 00:25:59,390 --> 00:26:02,870 fermentation هيكون لونها إما colorless أو تاخد لون 341 00:26:02,870 --> 00:26:09,980 ال media السلمونيلاالسلمونيلة برضه هتنمو على الطبق 342 00:26:09,980 --> 00:26:16,000 لكنها ما بتعمل fermentation فبالتالي مش هيطلع .. 343 00:26:16,000 --> 00:26:20,480 مش .. يعني هتطلع .. هتنمو على الطبق لكن هتكون 344 00:26:20,480 --> 00:26:23,340 colorless الاستفيلة الكوكاس Oreous هي gram 345 00:26:23,340 --> 00:26:28,820 positive مش راح تنمو أساساً هي الإشاري شاكولاي 346 00:26:28,820 --> 00:26:32,320 الـMetallic Sheen لإن تي روباكتر هيكون لونها pink 347 00:26:32,320 --> 00:26:38,780 أو dark purpleالسؤال هنا بيحكيلنا بالنسبة لـ 348 00:26:38,780 --> 00:26:42,780 lactose fermentation البروث media broth بيكون فيها 349 00:26:42,780 --> 00:26:48,900 سكر اللاكتوز for كوليفارم لو كانت عندي نامية 350 00:26:48,900 --> 00:26:54,460 الكوليفارم هل هتكون كل التيوبات لللاكتوز البروث 351 00:26:54,460 --> 00:26:55,900 البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث 352 00:26:55,900 --> 00:26:57,120 البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث 353 00:26:57,120 --> 00:27:00,480 البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث 354 00:27:00,480 --> 00:27:00,480 البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث 355 00:27:00,480 --> 00:27:00,540 البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث 356 00:27:00,540 --> 00:27:04,430 البروث البروتاني إشي من خلال استخدام الدرهام 357 00:27:04,430 --> 00:27:07,710 الديوب هل هتكون positive لما أبحث عن الكوليفورم؟ 358 00:27:07,710 --> 00:27:12,830 أكيد لأن الكوليفورم بتحمل fermentation للـLactose 359 00:27:12,830 --> 00:27:16,370 اللي في الـmedia عندي وبالتالي هتكون positive 360 00:27:16,370 --> 00:27:20,570 بالنسبة للـBiochemical tests وهي طبعا هتاخدوها 361 00:27:20,570 --> 00:27:25,150 بالتفصيل في الـEssential Microbiology الـEndol 362 00:27:25,150 --> 00:27:28,990 reaction كيف بعرف أنه positive بتكون حلقة لونها 363 00:27:28,990 --> 00:27:33,050 أحمرالمثل الـ Red أو الـ Voges of Roscawar من خلال 364 00:27:33,050 --> 00:27:37,850 تحول اللون إلى لون أحمر الـ Citrate بتحول اللون من 365 00:27:37,850 --> 00:27:42,290 أخضر إلى أزرق معناته هي إنها positive زي ما قلنا 366 00:27:42,290 --> 00:27:44,930 الأشريشيكولاي positive positive negative negative 367 00:27:44,930 --> 00:27:48,850 الantirobacter negative negative positive positive 368 00:27:48,850 --> 00:27:54,250 بالنسبة لل Rapid Identification Kits شغلات تأكيدية 369 00:27:54,250 --> 00:27:58,530 ممكن نلجأ لاستخدام الـ ABI ممكن مثلا لاستخدام 370 00:27:58,530 --> 00:28:04,820 السيرولوجياالجدول هذا قلنا المعمل اللي فات وهذا 371 00:28:04,820 --> 00:28:09,020 الجدول بحتاج إلى فهم مش حفظه كيف بنتعامل مع ال 372 00:28:09,020 --> 00:28:11,960 food أول ما يصلنا، أشهر هو ال treatment الصح وإيش 373 00:28:11,960 --> 00:28:17,100 ال preparation لإله لو كان عندي عينة liquid milk 374 00:28:17,100 --> 00:28:21,580 water juice ل treatment إما بعمله mix أو ب .. أو 375 00:28:21,580 --> 00:28:26,460 بستخدم ال stomach طب لما يكون إشي liquid بدي أعمله 376 00:28:26,460 --> 00:28:30,850 فقط shaking or mixing ال preparationمباشرة، هي 377 00:28:30,850 --> 00:28:34,210 يعني مافيش فيها وزنة إنما باخد باستخدام الـ pipet 378 00:28:34,210 --> 00:28:39,390 بأسحب قداش بدي volume و بحطه على الـ diluent و 379 00:28:39,390 --> 00:28:43,810 ببدأ أعمل cereal dilution viscous lipids، lipid 380 00:28:43,810 --> 00:28:48,690 بنعملها shaking و بعد هيك بأوزن و بأحط على ال 381 00:28:48,690 --> 00:28:52,350 diluent بالنسبة للـ food لما يكون solid water 382 00:28:52,350 --> 00:28:56,570 soluble، solid شغلة solid لكنها بتدوب في ال water 383 00:28:56,570 --> 00:29:02,870 زي مثلا ال saltالملح مطحون وجاهز مش بحاجة أن أنا 384 00:29:02,870 --> 00:29:06,750 أستخدمه لـ blender فبس علي إن أنا أعمل shaking بعد 385 00:29:06,750 --> 00:29:12,070 هيك بأوزن مقدار معين و بأحطه على الـ daily one ال 386 00:29:12,070 --> 00:29:18,290 powder و ال meat لحمة بستخدم لها ال stomacher و 387 00:29:18,290 --> 00:29:24,510 بعد هيك بأوزن و بأحطه على ال daily one ال cheese 388 00:29:24,510 --> 00:29:31,630 الجبنةSolid Stomacher أو بلندر بأوزن و اللي وزنته 389 00:29:31,630 --> 00:29:34,730 عشان بدي أتخلص من كل الفات اللي فيه بدي أدوبه 390 00:29:34,730 --> 00:29:38,190 بستخدم ال multiplying agent 2% Sodium citrate قبل 391 00:29:38,190 --> 00:29:43,660 هيك بأدفيه على درجة حرارة 45الـ spices، التوابل، 392 00:29:43,660 --> 00:29:47,080 الـ shaking، و بعدين بأوزن و بحط على الـ diluent 393 00:29:47,080 --> 00:29:50,720 الـ shellfish هو الـ fish product لـ stomach أو لـ 394 00:29:50,720 --> 00:29:56,540 blender و بأوزن بحط على الـ diluent الـ sample may 395 00:29:56,540 --> 00:30:00,440 be added into an empty stomacher bag زي فكرة 396 00:30:00,440 --> 00:30:04,660 الخلاط قلنا بدي أحط بالجار تبع لـ blender أول إشي 397 00:30:04,660 --> 00:30:09,400 عينتي بعدين بحط عليها الـ diluent و بعدين بشغل و 398 00:30:09,400 --> 00:30:10,020 بعمل mix