1
00:00:00,000 --> 00:00:05,560
الـ Coli Lert Test نفس الـ membrane filter test

2
00:00:05,560 --> 00:00:10,300
هذا بيكشف أو بيستخدم عينات الـ water اللي بدها تصير 

3
00:00:10,300 --> 00:00:14,880
أنه بيجيني الـ Coli Lert Test على شكل kit، الـ kit 

4
00:00:14,880 --> 00:00:18,520
هذا بيكون فيه الـ nutrients أو بيكون فيه reagents

5
00:00:18,520 --> 00:00:22,540
مغذيات و reagents، الـ reagents اللي فيه واحد اسمه

6
00:00:22,540 --> 00:00:28,640
MUG هذا بستعمله لأكشف عن الإشريكية القولونية؟ بكون 

7
00:00:28,640 --> 00:00:33,540
عندي عينة الـ water وبيكون فيه مع الـ kit بيكون فيه

8
00:00:33,540 --> 00:00:37,500
باقات لـ nutrient ولا reagent بروح أفتح الباقات بحط

9
00:00:37,500 --> 00:00:44,100
فيه الـ MUG بخليه incubation 24 ساعة وبعد هيك بروح 

10
00:00:44,100 --> 00:00:49,080
أعرض العينة لـ UV لو صار اللون fluorescent معناته 

11
00:00:49,080 --> 00:00:54,100
موجود بالعينة الإشريكية القولونية، الـ reagent الثاني اسمه 

12
00:00:54,100 --> 00:01:00,820
ONPG بنستعمله للكشف عن الـ Total Coliform بيكون فيه

13
00:01:00,820 --> 00:01:07,540
عينة الـ water بحط فيه المغذيات و reagent ONPG بعمله 

14
00:01:07,540 --> 00:01:12,200
incubation 24 ساعة وبعد هيك بلاحظ هل لون الميه

15
00:01:12,200 --> 00:01:17,120
اتغير إلى أصفر أو لا، لو اتغير معناته الموجود هو

16
00:01:17,120 --> 00:01:24,140
Total Coliform، الـ Colored يعتبر qualitative not

17
00:01:24,140 --> 00:01:28,690
quantitative يعني بقول لي هل موجود Total Coliform أو

18
00:01:28,690 --> 00:01:32,410
لا موجود الإشريكية القولونية في العينة أو لا، لكن قداش الـ

19
00:01:32,410 --> 00:01:36,950
concentration اللي لهم ما بنقدر نعرف، used to detect

20
00:01:36,950 --> 00:01:40,310
Total Coliform و الإشريكية القولونية، شو بعمل؟ add

21
00:01:40,310 --> 00:01:43,570
bucket of salt and nutrients to water sample

22
00:01:43,570 --> 00:01:47,950
وبعدين أعملهم incubation 24 hour، Total Coliform 

23
00:01:47,950 --> 00:01:54,440
بكشف عليها من خلال إضافة الـ ONPG reagent، فلو كان 

24
00:01:54,440 --> 00:01:58,260
موجود Total Coliform في العينة بتطلع البكتيريا هاي 

25
00:01:58,260 --> 00:02:02,980
إنزيم اسمه beta-galactosidase، بيجي هذا الإنزيم

26
00:02:02,980 --> 00:02:07,460
بيشتغل على الـ reagent اللي اسمه ONPG بيحولوه إلى مادة 

27
00:02:07,460 --> 00:02:12,360
اسمها الـ Nitrophenol لونها yellow، فمجرد ظهور

28
00:02:12,360 --> 00:02:14,980
اللون الـ yellow بعد 24 ساعة من الـ incubation

29
00:02:14,980 --> 00:02:20,020
معناته موجودة Total Coliform، طيب كيف بدكشف على

30
00:02:20,020 --> 00:02:26,410
وجود الإشريكية القولونية؟ بروح أضيف الـ MUG تمام، لو 

31
00:02:26,410 --> 00:02:32,110
الموجود إشريكية قولونية هتطلع Glucuronidase إنزيم بيجي

32
00:02:32,110 --> 00:02:36,450
هذا الإنزيم بيشتغل على الـ MUG بيحوله إلى molecule

33
00:02:36,450 --> 00:02:41,690
that fluoresces under UV، هيصير وميض تحت الـ UV 

34
00:02:41,690 --> 00:02:46,190
light، لكن مشكلة الـ Coli Lert Test أنه ما بقدر

35
00:02:46,190 --> 00:02:49,650
يكشف عن طول الـ strains من الإشريكية القولونية اللي 

36
00:02:49,650 --> 00:02:54,370
بتشمل كمان الـ pathogenic strains، احنا قلنا

37
00:02:54,370 --> 00:02:59,270
الـ Coli Lert موجود أنه على شكل kit، الـ kit بيكون فيه 

38
00:02:59,270 --> 00:03:03,470
باقات لـ nutrient لـ reagent، حاليًا قد طوروا الـ

39
00:03:03,470 --> 00:03:07,410
test هذا، فصاروا يعملوا الـ media سواء كانت الـ broth

40
00:03:07,410 --> 00:03:12,430
أو الـ agar من ضمن مكونات الميديا الـ ONPG والـ MUG 

41
00:03:12,430 --> 00:03:17,050
الـ Coli Lert بيكشف عن الكوليفورم الإشريكية القولونية

42
00:03:17,050 --> 00:03:20,930
اللي موجودة في المياه العذبة الـ fresh water لكن 

43
00:03:20,930 --> 00:03:24,280
عملوا Coli Lert 18، هذه بيكشف عن الكوليفورم

44
00:03:24,280 --> 00:03:27,200
الإشريكية القولونية اللي موجودة في الـ marine waters في 

45
00:03:27,200 --> 00:03:32,960
المياه المالحة، احنا قلنا الـ Coli Lert فحص qualitative

46
00:03:32,960 --> 00:03:39,640
طوروه، عدلوا، صار quantitative test، كيف بيستخدموا

47
00:03:39,640 --> 00:03:45,040
حاجة اسمها quantitative، الـ quantitative هي زي

48
00:03:45,040 --> 00:03:50,500
الصينية اللي عندكم في الرسمة هاي، بيكون فيها آبار

49
00:03:51,920 --> 00:03:56,440
الفكرة بيكون عندي الـ water sample بعملها التخفيفات 

50
00:03:56,440 --> 00:04:00,040
اللازمة، بعد هيك على كل تخفيف بدي أضيف الـ reagent و

51
00:04:00,040 --> 00:04:05,200
بعمل mix من كل تخفيف، بروح أخد وبحط على الـ well الأول

52
00:04:05,200 --> 00:04:09,100
من الـ well الثاني، فبعمل تخفيف على الـ well اللي بعده ومن 

53
00:04:09,100 --> 00:04:13,440
اللي بعده وهكذا، بعد هيك بعملهم incubation 24 ساعة

54
00:04:13,440 --> 00:04:18,100
على درجة حرارة 37 وبروح أشوف إيش اللون اللي راح

55
00:04:18,100 --> 00:04:24,870
يتغير فيه، اللون أصفر وبروح أعد اللون الأصفر اللي 

56
00:04:24,870 --> 00:04:28,890
طلع عندي في الـ quantity الـ tray وبروح لجدول بقول له 

57
00:04:28,890 --> 00:04:32,850
لو طلع معي عدد الـ wells اللي اتغيرت لونها هلقات بعدين

58
00:04:32,850 --> 00:04:36,270
إنه كم بطلع الـ concentration من الجدول بعرف قداش

59
00:04:36,270 --> 00:04:41,250
الـ concentration للبكتيريا، فالـ analyte لـ Coli Lert 

60
00:04:41,250 --> 00:04:43,690
إيش المقصود بالـ analyte؟ يعني الشيء اللي 

61
00:04:43,690 --> 00:04:47,170
أنا بدور عليه، الـ Coli Lert بيبحث عن الـ Total

62
00:04:47,170 --> 00:04:50,810
Coliform عن الإشريكية القولونية، طيب الـ time to

63
00:04:50,810 --> 00:04:53,710
result قداش بحتاج الـ time لتطلع النتيجة؟ يعني قداش 

64
00:04:53,710 --> 00:04:59,370
بحتاج الـ incubation؟ بحتاج 24 hour، النتائج لو طلع

65
00:04:59,370 --> 00:05:05,390
colorless معناته negative إن العينة مافيش فيها شيء

66
00:05:05,390 --> 00:05:10,470
لو طلع لون أصفر بعد 24 ساعة معناته موجود Total

67
00:05:10,470 --> 00:05:14,770
Coliform، لو عرضتها إلى الـ UV وطلع fluorescent

68
00:05:14,770 --> 00:05:20,370
معناته موجودة الإشريكية القولونية، ما قلنا فيه الـ 

69
00:05:20,370 --> 00:05:24,450
Coli Lert بيكشف عن الـ Coliform والإشريكية Coli

70
00:05:24,450 --> 00:05:28,890
عن الـ Entero Lert اسمها طريقة بتكشف عن الـ Enterococcus

71
00:05:28,890 --> 00:05:36,210
فكيف فكرة الـ test هذا؟ بيكون عندي عينة المي اللي 

72
00:05:36,210 --> 00:05:41,570
هي water sample بحط عليها الـ reagent وبعدين بشوف 

73
00:05:41,570 --> 00:05:46,860
اللون اتغير أو لأ، لو صار fluorescence معناته موجود 

74
00:05:46,860 --> 00:05:50,580
Enterococcus، بغض النظر عن الـ species سواء Enterococcus 

75
00:05:50,580 --> 00:05:55,660
faecium أو faecalis، لو not fluorescence ما صار تغيير

76
00:05:55,660 --> 00:05:59,800
في اللون يعني لما عرضته لـ UV معناته الموجود not 

77
00:05:59,800 --> 00:06:05,340
Enterococcus، يعني عند العينة أنها negative في الـ Entero

78
00:06:05,340 --> 00:06:08,340
Lert، 3 agent is used for detection of

79
00:06:08,340 --> 00:06:12,080
Enterococcus bacteria such as Enterococcus faecium و

80
00:06:12,080 --> 00:06:17,330
Enterococcus faecalis سواء كان بالـ fresh or marine water

81
00:06:17,330 --> 00:06:21,310
ليه بعد و هذا مش لازمنا؟ إيش الـ .. إيش الـ analyte 

82
00:06:21,310 --> 00:06:23,350
في الـ Entero Lert test؟ analyte يعني الشيء اللي

83
00:06:23,350 --> 00:06:26,250
بدور عليه، قلنا هذا فقط بيكشف عن الـ Entero .. الـ

84
00:06:26,250 --> 00:06:29,490
Enterococcus، طيب، قداش بحتاج إلى time أو الـ

85
00:06:29,490 --> 00:06:34,210
incubation؟ 24 ساعة، لو طلع معي fluorescent معناته 

86
00:06:34,210 --> 00:06:37,990
Enterococcus، لو non-fluorescence معناته negative

87
00:06:37,990 --> 00:06:44,630
بعرضها إلى الـ UV light، هذا كان الـ Entero Lert

88
00:06:44,630 --> 00:06:50,630
بالأول qualitative يعني موجود أو مش موجود، بعد هيك

89
00:06:50,630 --> 00:06:54,590
طوروه فصار quantitative من خلال الـ Quanti-Tray

90
00:06:54,590 --> 00:06:59,730
بعدين قداش اللي اتغير لونهم، بروح لجدول وبشوف الـ

91
00:06:59,730 --> 00:07:03,830
concentration اللي لهم، بس في معلومة مهمة بقول لي

92
00:07:03,830 --> 00:07:07,210
أنه لو بدي أتعامل مع الـ UV بدي ألبس الـ Anti-UV

93
00:07:07,210 --> 00:07:12,670
glasses or goggles، الجدول هي اللي قلنا عليها

94
00:07:14,040 --> 00:07:19,960
بالنسبة للـ Basic steps من جمع العينات إلى تفسير

95
00:07:19,960 --> 00:07:25,020
النتائج، Collection أو Collecting samples بيصير جمع

96
00:07:25,020 --> 00:07:29,540
للعينات بواسطة الـ Collector، بعدين بيصير فيه

97
00:07:29,540 --> 00:07:33,140
Transporting samples نقل للعينات حسب الظروف اللي 

98
00:07:33,140 --> 00:07:36,500
كانت موجودة فيها، Delivering samples لما تصلني على 

99
00:07:36,500 --> 00:07:40,620
المختبر، أما بشتغلها مباشرة إن هذا هو الأفضل أو أنه 

100
00:07:40,620 --> 00:07:45,690
بخزنها لعند ما أفضل، لكن التخزين بدي يكون صح لا بـ

101
00:07:45,690 --> 00:07:48,830
preparation، كيف بدي أجهز المعمل؟ يعني إيش المقصود 

102
00:07:48,830 --> 00:07:52,370
فيها؟ إنه بدي أعقم المكان اللي بدي أشتغل عليه؟ إنه 

103
00:07:52,370 --> 00:07:56,570
مثلًا بدي أحضر الـ media اللي بتلزمني؟ طيب الـ

104
00:07:56,570 --> 00:08:00,130
preparing sample، عينتي لو كانت مثلًا liquid بدي 

105
00:08:00,130 --> 00:08:03,350
أعملها mix or shaking، لو كانت صلبة بدي أعملها

106
00:08:03,350 --> 00:08:06,310
باستخدام الـ blender أو الـ stomacher لحد إن هي تكون

107
00:08:06,310 --> 00:08:13,090
عندي عندي عينة homogeneous، incubating sample،

108
00:08:13,090 --> 00:08:15,930
reading sample، disposing sample، خلاص بقى أخلص

109
00:08:15,930 --> 00:08:19,110
منها بالنهاية، بالنسبة للـ Data Management والـ

110
00:08:19,110 --> 00:08:23,210
Data Interpretation هي تفسير النتائج، بقول لي إنه 

111
00:08:23,210 --> 00:08:26,390
هذه الأشياء مش شغلنا احنا شغلنا بس يعني احنا 

112
00:08:26,390 --> 00:08:29,010
مسؤولين بدنا نطلع الـ concentration اللي

113
00:08:29,010 --> 00:08:33,470
بيحكي لنا إنه التركيز مناسب أو لا مقارنة مع الـ

114
00:08:33,470 --> 00:08:37,570
standard، هي الجهات المسؤولة هذا مش شغلي أنا، طيب 

115
00:08:37,570 --> 00:08:41,280
شو بحتاج إلى مواد أو equipment؟ بيبتون water 

116
00:08:41,280 --> 00:08:45,680
بستخدمه كـ diluent، هي الـ normal saline والبيبتون 

117
00:08:45,680 --> 00:08:49,760
saline هي كلها diluent بنخفف العينات فيها، بنخفف

118
00:08:49,760 --> 00:08:52,780
البكتيريا في العينة عشان ما نحكي too numerous to

119
00:08:52,780 --> 00:08:57,880
count، Sodium citrate هذا شو بيعمل؟ Sodium

120
00:08:57,880 --> 00:09:03,580
citrate بتركيز 2% يستخدم كـ emulsifying agent، ما نرجع 

121
00:09:03,580 --> 00:09:06,800
علينا لما قلنا لما يكون عند الـ food فيه نسبة دهن

122
00:09:06,800 --> 00:09:11,710
كتيرة، فبدي أدوب كل المحتويات اللي بالعينة بستخدم 

123
00:09:11,710 --> 00:09:15,170
الـ emulsifying agent Sodium Citrate، بس قبل اللي 

124
00:09:15,170 --> 00:09:18,510
أستخدمه لازم أعمله الـ Pre-warming على درجة حرارة 

125
00:09:18,510 --> 00:09:22,630
خمسة وأربعين سيليزياس، Lauryl Sulfate Tryptose

126
00:09:22,630 --> 00:09:26,190
Broth قلنا هي الـ Media Broth تُعتبر Screening

127
00:09:26,190 --> 00:09:30,870
Test أو Pre-sumptive وبأستخدمها لـ Total Coliform

128
00:09:30,870 --> 00:09:37,440
Media فيها Lactose لكن ما فيها pH Indicator، كيف بقدر

129
00:09:37,440 --> 00:09:41,060
أعرف إن البكتيريا عملت fermentation لللاكتوز أو لا؟

130
00:09:41,060 --> 00:09:45,980
من خلال خروج للغاز باستخدام الـ Durham tube، الـ

131
00:09:45,980 --> 00:09:51,320
Brilliant Green Lactose 2% Broth نفس الشيء، ميديا 

132
00:09:51,320 --> 00:09:59,040
فيها لاكتوز لكن فيها لون فهي Confirmatory test

133
00:09:59,040 --> 00:10:03,380
للكوليفورم الإشريكية Coli، Broth هيقول لنا عليها 

134
00:10:03,380 --> 00:10:09,540
Confirmatory test لـ الـ fecal coliform، ممكن يكون 

135
00:10:09,540 --> 00:10:13,080
أيضًا فيه إشريكية قولونية Broth with MUG، احنا قلنا قبل 

136
00:10:13,080 --> 00:10:19,840
شوية إنه الـ Coli Lert فيه two reagent ONPG 

137
00:10:19,840 --> 00:10:23,980
و MUG، وصار حاليًا إنه بيستخدموا الـ reagent 

138
00:10:23,980 --> 00:10:26,700
هذول اللي بيحطوهم على الـ media سواء كانت الـ broth

139
00:10:26,700 --> 00:10:34,560
أو كانت Agar، Eosin Methylene Blue أو Endo agar، قلنا 

140
00:10:34,560 --> 00:10:38,740
الـ Eosin Methylene Blue فيها صبغتين لو اللي نمت عندي 



141
00:10:38,740 --> 00:10:42,540
شريشة كولاي هتعمل a might bond بين الصبغتين

142
00:10:42,540 --> 00:10:45,820
وبالتالي هيصير اللي هونها green metallic sheen طيب

143
00:10:45,820 --> 00:10:49,120
لو كان اللي نامي عندي هي الـ Enterobacter هتعمل

144
00:10:49,120 --> 00:10:52,120
precipitate عشان لأ الصبغات هي في منتصف الكلونز

145
00:10:52,120 --> 00:10:57,320
وبالتالي هيطلع شكلها الـ fish eye الـ Endogar قلنا

146
00:10:57,320 --> 00:11:01,500
high differential media شو فيها؟ فيها لكتوز و فيها

147
00:11:01,500 --> 00:11:08,060
فوكسين داي فبتنمي الكوليفورم وبتميزها من خلال الـ

148
00:11:08,060 --> 00:11:12,260
dark red with metallic gold sheen اللي هو الأحمر

149
00:11:12,260 --> 00:11:15,880
غامق ما فيها بيكون فيه لمعة اللي ماكن كأجار high

150
00:11:15,880 --> 00:11:20,540
media بتنمي لجرام negative بتشوف إذا البكتيريا عمل

151
00:11:20,540 --> 00:11:25,920
fermentation لأ لكتوز أو لألـ Nutrient Agar أو Non

152
00:11:25,920 --> 00:11:28,940
-Selective Agar قولنا هاي الـ General Media ما

153
00:11:28,940 --> 00:11:32,700
فيها Inhibitors ليش بستخدم الـ Nutrient Agar

154
00:11:32,700 --> 00:11:35,700
بإضافة إنها بتنمي جميع أنواع الـ Microorganism

155
00:11:35,700 --> 00:11:41,120
برضه بستخدمها في حالة الـ Biochemical Test إحنا

156
00:11:41,120 --> 00:11:44,500
قولنا لو كانت الـ Colonies بستخدم عليها الـ TTC

157
00:11:44,500 --> 00:11:49,220
Triphenyl Tetrazolium Chloride هذا الأشي راح تغير

158
00:11:49,220 --> 00:11:52,780
من خصائص البكتيريا وبالتالي مش راح تظبط أنه

159
00:11:52,780 --> 00:11:56,640
أستخدمهاللـ biochemical test بدي أستخدم البكتيريا

160
00:11:56,640 --> 00:12:00,580
لل biochemical test لازم تكون fresh و نامية فقط

161
00:12:00,580 --> 00:12:04,380
على الـ Nutrient Agar أو أي ميديا non-selective

162
00:12:04,380 --> 00:12:09,480
الـ water bath بقولّي water level should be above

163
00:12:09,480 --> 00:12:16,360
the medium in immersed tube لازم أن المي تكون

164
00:12:16,360 --> 00:12:20,340
غامرة العينة في الـ water bath مشان يصير توزيع درجة

165
00:12:20,340 --> 00:12:24,330
الحرارة بشكل متجانس الـ Thermometer بستخدمه لأقيس

166
00:12:24,330 --> 00:12:28,570
درجات الحرارة الـ Stomacher أو البلندر بستخدم لطحن

167
00:12:28,570 --> 00:12:30,910
الطعام السترد بتحوله لليكود لحتى أنه يصير

168
00:12:30,910 --> 00:12:35,310
homogenous في عندي حاجة اسمها الـ Control cultures

169
00:12:35,310 --> 00:12:41,110
بستخدمه ATCC culture or equivalent شو هي الـ ATCC؟

170
00:12:41,110 --> 00:12:46,370
هي American Type Culture Collection هي عبارة عن

171
00:12:46,370 --> 00:12:51,860
مؤسسة بتجيب عينات الـ controlات على المعامل وبيتوزعها

172
00:12:51,860 --> 00:12:56,980
على البلدان طيب شو السبب؟ بقول ليه مثلا لو .. لو

173
00:12:56,980 --> 00:13:01,300
إجي حد اشتغل على عينة إشاريشا كولاي وطلعت معاه

174
00:13:01,300 --> 00:13:09,220
positive مع فحص معين إجي حد تاني اشتغل من طبق تاني

175
00:13:09,220 --> 00:13:13,060
برضه هذا الطبق مكتوب عليه إشاريشا كولاي واشتغل نفس

176
00:13:13,060 --> 00:13:17,300
الفحص لكن طلعت معاه النتيجة negative طب مع أن

177
00:13:17,300 --> 00:13:21,400
الأثنين كانوا نفس الإشاريشا يعنينفس الاسم

178
00:13:21,400 --> 00:13:25,260
Escherichia coli ونفس الفحص لكن الاختلاف كان يعني

179
00:13:25,260 --> 00:13:28,100
كل واحد منطبق طب يعني وين المشكلة بدها تكون؟

180
00:13:28,100 --> 00:13:31,860
المشكلة بتكون أن Escherichia coli المستخدمة كانت

181
00:13:31,860 --> 00:13:36,380
من strains مختلفة، من سلالات مختلفة طيب حكوا بدنا

182
00:13:36,380 --> 00:13:41,060
نحل هاي المشكلة فبدنا نعطي البكتيريا اللي أشتغلنا

183
00:13:41,060 --> 00:13:46,160
عليها بنعطيها أرقام و بنوزعها كـ controlات على بلدان

184
00:13:46,160 --> 00:13:50,710
العالم فالبكتيريا اللي إحنا ابتجيلنا على المعمل

185
00:13:50,710 --> 00:13:55,290
بتكون جاية من برا يعني بتكون بكتيريا بتكون مستوردة

186
00:13:55,290 --> 00:14:01,750
فابتجيلها على شكل كريستالات بلاستيك بنحلها على

187
00:14:01,750 --> 00:14:06,750
الطبق بطريقة معينة أسباب المثال كان عندي بكتيريا

188
00:14:06,750 --> 00:14:12,890
الشريشة كولاي الـ ATCC لإلها 4321 4321 هذا هو

189
00:14:12,890 --> 00:14:19,010
رقم الـ strains لإلها فلازم هاي البكتيريا تطلع نفس

190
00:14:19,010 --> 00:14:22,830
النتيجة في كل بلدان العالم لهذا النوع من الـ

191
00:14:22,830 --> 00:14:27,690
strains كل واحد اشتغل على هذا الـ strain بفحص معين

192
00:14:27,690 --> 00:14:34,330
لازم الكل يتطابقوا بنفس النتيجة بالنسبة للـ

193
00:14:34,330 --> 00:14:39,150
positive control عسب المثال الشريشة كلها بتطلع

194
00:14:39,150 --> 00:14:44,610
جهاز ع درجة حرارة 44.5 أو 45 اللي انكبتوا 24 ساعة

195
00:14:44,610 --> 00:14:47,630
لإنه كل هاي يعتبر من الفيكا الكوليفورم هاي اللي

196
00:14:47,630 --> 00:14:50,830
فيها أربعات كمان عندها القدرة إنها تعمل

197
00:14:50,830 --> 00:14:54,550
fermentation للاكتوز بتطلع أسد و بيتجاز كمان على

198
00:14:54,550 --> 00:15:00,030
الـ EMP Green Metallic Sheen لو استخدمت الإشاريشا

199
00:15:00,030 --> 00:15:06,430
كولاي MUG broth كمان عندها القدرة إنها اتحول للون

200
00:15:06,430 --> 00:15:11,090
أصفر أو لون fluorescent معناته موجودة الإشاريشا

201
00:15:11,090 --> 00:15:15,790
كولايبالنسبة لـ MVEC في الإشاريش كولاي بيكون

202
00:15:15,790 --> 00:15:19,390
Positive Positive Negative Negative بالنسبة للـ

203
00:15:19,390 --> 00:15:21,410
Negative Control استخدموا الـ Enterobacter

204
00:15:21,410 --> 00:15:26,370
Aerogenes هذه البكتيريا على الـ EMP طبعاً بتطلع

205
00:15:26,370 --> 00:15:32,870
Fish Eye بالنسبة لـ Indol هتكون عكس الإشاريش كولاي

206
00:15:33,300 --> 00:15:36,540
بقولنا الشريشة positive positive negative negative

207
00:15:36,540 --> 00:15:39,380
الـ Antibiotic هتكون negative negative positive

208
00:15:39,380 --> 00:15:44,720
positive الـ MPN broths المقصود فيها اللي هي الـ

209
00:15:44,720 --> 00:15:52,320
LST الـ BGLP و الـ EC broth لاحظوا إن السلمونيلا

210
00:15:52,320 --> 00:15:58,330
طبعا الـ Media هاي بيكون فيها lactose السلمونيلا هي

211
00:15:58,330 --> 00:16:01,150
من ضمن الـ Enterobacteriaceae لكن non-lactose

212
00:16:01,150 --> 00:16:04,310
fermenter بالتالي مش راح يطلع معها جاز لهيك حكوا

213
00:16:04,310 --> 00:16:08,070
إن السلمونيلا تعتبر negative من ناحية الـ MPN

214
00:16:08,070 --> 00:16:15,730
growth gas negative in MPN growth بالـ EC growth

215
00:16:15,730 --> 00:16:20,490
طب ليش ما استخدموا الـ Enterobacter aerogenes ك

216
00:16:20,490 --> 00:16:27,260
MPN growth negative control قالوا إنه بعض السلالات

217
00:16:27,260 --> 00:16:28,480
من الـ Enterobacter

218
00:16:28,480 --> 00:16:49,480
aerogenes

219
00:16:56,010 --> 00:17:02,970
باستخدام NaCl باستخدام HCl و NaOH طيب لو بحتاج

220
00:17:02,970 --> 00:17:06,870
شغلات ك confirmatory بنلجأ ل الـ biochemical test

221
00:17:06,870 --> 00:17:12,470
اللي هي بنستخدم الـ MVC فلتريبتون، هاد لتريبتون

222
00:17:12,470 --> 00:17:20,170
بيعتبر reagent للـ Indol كيف بعرف أنه صار positive

223
00:17:20,170 --> 00:17:27,060
أنه بتطلع رنج لونها أحمر؟ فالاشريشيا كلها بالنسبة

224
00:17:27,060 --> 00:17:30,540
لـ MVIC كانت positive positive negative negative

225
00:17:30,540 --> 00:17:33,640
لأن تربع أكتر negative negative positive positive

226
00:17:33,640 --> 00:17:37,720
كمان ممكن نلجأ للـ rapid identification kit زي مثلا

227
00:17:37,720 --> 00:17:45,170
باستخدام الـ API وهي Analytical Profile Index بيكون

228
00:17:45,170 --> 00:17:51,090
فيها أنابيب صغيرة كتير بتكشف عن الـ 20 فحص بنفس

229
00:17:51,090 --> 00:17:57,490
العينة بوزعها على الـ 20 well من ضمن هذه الفحصات

230
00:17:57,490 --> 00:18:02,310
بتكشف عن الـ ONPG قولنا هذه متخصصة بالكشف عن الـ

231
00:18:02,310 --> 00:18:06,230
Total Coliform كمان في كمان لـ LVDK اللي يعتبر

232
00:18:06,230 --> 00:18:10,210
Automated Test وكمان في شغلات تانية كـ

233
00:18:10,210 --> 00:18:15,830
Coliformatory بالنسبة لطريقة التعامل مع أي عينة

234
00:18:15,830 --> 00:18:19,310
each sample unit may be analyzed individually طبعا

235
00:18:19,310 --> 00:18:24,890
كل عينة بيتعامل معاها بشكل مستقل وعلى انفراد كمان

236
00:18:24,890 --> 00:18:29,550
شو بدي أعمل أنه أول ما تيجيلي العينة بدي أحافظ

237
00:18:29,550 --> 00:18:32,810
عليها على الـ room temperature معاها العينة المجمدة

238
00:18:32,810 --> 00:18:38,530
والمثلجة العينة المجمدة بحافظ عليها في الظروف اللي

239
00:18:38,530 --> 00:18:43,150
كانت موجودة فيها بحطها في ice بيكون درجة الحارة أقل

240
00:18:43,150 --> 00:18:48,350
من zero للتلاجة بحطها في ظروف من 2 ل 5 لو بدي

241
00:18:48,350 --> 00:18:54,710
أسيح العينات المجمدة بنزلها على التلاجة لو مستعجلة

242
00:18:54,710 --> 00:19:00,070
عليها على الـ water bath في درجة لا تزيد عن 45 ومدة

243
00:19:00,070 --> 00:19:04,760
لا تزيد عن ربع الساعة المفترض إنه analyze sample

244
00:19:04,760 --> 00:19:07,240
unit as soon as possible after they're received in

245
00:19:07,240 --> 00:19:10,960
the laboratory بالنسبة لـ Shellfish اللي هي المحار

246
00:19:10,960 --> 00:19:16,220
أو القواقع لازم نشتغلها بسرعة لمدة 24 ساعة بعد

247
00:19:16,220 --> 00:19:22,440
جمعها ما نفعش إنه انخزنها لإنه بعد هيك بتتلف ال

248
00:19:22,440 --> 00:19:26,600
preparation for analysis Sterile Peptone Water بدي

249
00:19:26,600 --> 00:19:31,240
أعقم بدي أحضر الـ diluent بعد هيك بدي أعقمه أحطه

250
00:19:31,240 --> 00:19:35,440
بالـ autoclave أclean the surface of working area

251
00:19:35,440 --> 00:19:37,800
ودي استخدم الـ disinfectant وبيحقم المكان اللي بدي

252
00:19:37,800 --> 00:19:41,860
أشتغل عليه بعد هيك بدي أحضر الـ ST broth قلنا هي

253
00:19:41,860 --> 00:19:48,440
ميديا فيها لكتوز لكن مافيها pH indicator بالنسبة

254
00:19:48,440 --> 00:19:51,700
لـ typical growth result observed for EC broth

255
00:19:51,700 --> 00:19:55,820
بالنسبة للإشريشا كولايا broth كيف بدي أعرف إنه صار

256
00:19:55,820 --> 00:20:01,790
فيه نمو أول حاجة طالما هي عندي الـ Growth معناته

257
00:20:01,790 --> 00:20:06,990
بدي ألاحظ من خلال العقارة، هاي واحد تاني شغلة

258
00:20:06,990 --> 00:20:11,750
بلاحظ من خلال استخدام الدرهم، الـ tube و بقى أشوف

259
00:20:11,750 --> 00:20:18,030
إذا اتكون فيها غاز أو لأ فبنتطلع على تخفيف عشرة

260
00:20:18,030 --> 00:20:23,250
أقل سالب ستة كلهم Clear معناته Zero يعني ولا واحدة

261
00:20:23,250 --> 00:20:28,560
فيها نمو عشرة أقل سالب خمسة كلهم Clear برضه معناته

262
00:20:28,560 --> 00:20:32,260
ولو واحدة فيها نو فـ 0 بدي يكون عشر أقل سالب أربعة

263
00:20:32,260 --> 00:20:37,280
في turbidity في اتنين و level نص high clear فبدي

264
00:20:37,280 --> 00:20:41,980
أكتب اتنين عشر أقل سالب تلاتة التلاتة فيهم

265
00:20:41,980 --> 00:20:45,540
turbidity عشر أقل سالب اتنين التلاتة فيهم كمان

266
00:20:45,540 --> 00:20:48,920
turbidity فالرقم اللي طلع معي ابتدائي من أعلى

267
00:20:48,920 --> 00:20:53,240
تخفيف إلى أقل تخفيف تلاتة تلاتة اتنين زيرو زيرو

268
00:20:54,390 --> 00:20:59,630
برجع للجدول و باخد الرقم هاد و بشوف ضمن الجدول مين

269
00:20:59,630 --> 00:21:03,570
هي اللي بيكون فيها خمس تخفيفات كل تخفيف قيلو تلت

270
00:21:03,570 --> 00:21:08,190
تيوبات كم قيلو الـ concentration هاد هي طريقة ال

271
00:21:08,190 --> 00:21:12,570
MPN شوفت الاتيوبات اللي عندي يعني مثلا عشرة و

272
00:21:12,570 --> 00:21:15,530
أسالب اتنين اعملناله تلت اتيوبات عشرة و أسالب تلت

273
00:21:15,530 --> 00:21:18,570
اعملناله برضه كمان تلت اتيوبات عشرة و أسالب أربع و

274
00:21:18,570 --> 00:21:22,090
هكذا بشوف قداش في عندي الـ turbidity و بامشي

275
00:21:22,090 --> 00:21:25,770
بالترتيب من 10 أس 3 ب 2 ل 10 أس 3 ب 3 قدش فيهم ال

276
00:21:25,770 --> 00:21:31,650
durability فبكتب الرقم طلب معايا 33200 باخد الرقم

277
00:21:31,650 --> 00:21:36,670
هات بروح أدور فيه الجدول في خانة كم من تخفيف

278
00:21:36,670 --> 00:21:41,690
بختار عن رقم 5 لإن أنا هيني عاملة عن خمس تخفيفات

279
00:21:41,690 --> 00:21:45,330
من 10 أس 3 ب 2 ل 10 أس 3 ب 6 بعد هيك بدور على عدد

280
00:21:45,330 --> 00:21:49,010
الـ tubes لكل تخفيف أنا حاط تلات تخفيفة، أنا حاط 

281
00:21:49,010 --> 00:21:53,030
تلات تيوبات ممكن أحط أربعة، ممكن خمسة فبدور في ال

282
00:21:53,030 --> 00:21:57,810
gradual وين خمس تخفيفات وإلو تلات تيوبات وبطلع 

283
00:21:57,810 --> 00:22:02,270
معايا الـ concentration لإلهم وهذه طريقة الـ NPN

284
00:22:02,270 --> 00:22:06,790
اللي راح نستخدم إن شاء الله في المعمل القادم لملة

285
00:22:06,790 --> 00:22:10,860
هاد هو لـ EMB أيوزين ميثاين إبلوملون لما يكون

286
00:22:10,860 --> 00:22:14,400
green متالكشين معناته اللي نمت عندي هي الاشريشيا

287
00:22:14,400 --> 00:22:19,440
كولاي لما يكون ال colors في النص فيها اشي غامق،

288
00:22:19,440 --> 00:22:23,840
dark، purple، شكل ال fish eye معناته high

289
00:22:23,840 --> 00:22:29,740
enterobacter الـ EMB is a primer لـ differential

290
00:22:29,740 --> 00:22:35,220
medium هي بتميز بين الاشريشيا كولاي وبين الأنواع 

291
00:22:35,220 --> 00:22:38,820
التانية اللي راح تنمو على الطبق However, it does

292
00:22:38,820 --> 00:22:42,300
inhibit the growth of some gram-positive bacteria

293
00:22:42,300 --> 00:22:46,040
طالما هي بتعمل inhibition لبعض من ال gram-positive

294
00:22:46,040 --> 00:22:49,620
بكتيريا أو بتنمي لجرام نيجاتيف معناته برضه كمان 

295
00:22:49,620 --> 00:22:55,300
selective agent EMB is selective media EMB is used

296
00:22:55,300 --> 00:22:58,220
to differentiate between enteric lactose fermenter

297
00:22:58,220 --> 00:23:01,440
and non-lactose fermenter الـ EMB بتميز بين

298
00:23:01,440 --> 00:23:03,420
الكوليفور والنون كوليفور

299
00:23:05,980 --> 00:23:10,180
وبشكل خاص هي بتميز الاشريشيا كولاي من خلال الـ green

300
00:23:10,180 --> 00:23:14,460
metallication يوزين مثلين بلو أجار contain فيها

301
00:23:14,460 --> 00:23:19,220
بيبتون وهذا كمصدر للتغذية، فيها لاكتوز، بتميز

302
00:23:19,220 --> 00:23:21,620
البكتير اللي بتعمل lactose fermenter and non

303
00:23:21,620 --> 00:23:27,180
-lactose fermenter الصبغات اللي فيها تستخدم

304
00:23:27,180 --> 00:23:33,220
لـ inhibition لـ gram positive فالـ Selective agent

305
00:23:33,220 --> 00:23:38,360
هي الصبغة اللي بيبتغل اللكتوز كـ differential

306
00:23:38,360 --> 00:23:42,640
agent دي sugars provide fermentable substrate to

307
00:23:42,640 --> 00:23:45,800
encourage growth of fecal coliform الصبغة بتعمل

308
00:23:45,800 --> 00:23:49,800
inhibition لليجرام positive organism لما بتعمل

309
00:23:49,800 --> 00:23:55,760
fermentation هيطلع منها ال acid وبالتالي هيطلع لون

310
00:23:55,760 --> 00:24:00,980
dark purple بشبه ال fish eye The use of methylene

311
00:24:00,980 --> 00:24:05,260
blue dyes cause lactose fermenters to have pink

312
00:24:05,260 --> 00:24:09,500
colonies إذا كانت lactose fermenter هيكون لون

313
00:24:09,500 --> 00:24:14,060
الكونية لونها pink الشريشة بتقوم بتعمل incorporate so

314
00:24:14,060 --> 00:24:18,680
much of the dye يعني بتعمل peptide bond لصبغات مع

315
00:24:18,680 --> 00:24:21,600
بعض precipitated in the cell and give the colonies

316
00:24:21,600 --> 00:24:25,480
a metallic green sheen non-lactose fermenter اللي

317
00:24:25,480 --> 00:24:29,590
مابتعمل fermentation لأ اللاكتوز حضلهالونها هيكون

318
00:24:29,590 --> 00:24:32,430
شو colorless or take on the color of the media أو

319
00:24:32,430 --> 00:24:36,650
هتاخد لون الـ media نفسه زي مين السلمونيلا هي من

320
00:24:36,650 --> 00:24:40,830
ضمن الـ bacteria سلاكلها Lactose fermenter

321
00:24:40,830 --> 00:24:45,270
السلمونيلا زي ما قلنا انها بتعمل food poisoning

322
00:24:45,270 --> 00:24:49,450
this media is used to confirm the presence of

323
00:24:49,450 --> 00:24:52,330
Escherichia coli in water sample contaminated with

324
00:24:52,330 --> 00:24:56,760
sewage or fecal material هي نقدر نعرف من خلالها إنه

325
00:24:56,760 --> 00:24:59,240
هاي إشريشيا كولاي لكن برضه كمان بنحاجة إن إحنا 

326
00:24:59,240 --> 00:25:03,740
نتأكد من خلال الـ Biochemical Test you will use

327
00:25:03,740 --> 00:25:06,900
this agar again with the water sampling experiment

328
00:25:06,900 --> 00:25:09,160
to differentiate between إشريشيا كولاي and

329
00:25:09,160 --> 00:25:13,700
Enterobacter لو بدي أميز نمط الإشريشيا كولاي أو

330
00:25:13,700 --> 00:25:17,620
الـ Enterobacter فيه العينة من خلال الـ EMB

331
00:25:17,620 --> 00:25:21,760
الإشريشيا كولاي الـ Green Metallic Sheen و الـ

332
00:25:21,760 --> 00:25:25,470
Enterobacter شكلها بيكون الـ Fish Eye The dark

333
00:25:25,470 --> 00:25:29,190
cholinesterase produced on EMB agar is a result of the

334
00:25:29,190 --> 00:25:31,630
acid produced during lactose fermentation

335
00:25:31,630 --> 00:25:37,570
precipitating the dyes in the media الشريشية 

336
00:25:37,570 --> 00:25:41,570
كولاي بتعمل بـ peptide bond or amide bond بين

337
00:25:41,570 --> 00:25:46,790
الصبغتين و بيصير لون أخضر لإن تيلوباكتر إيروجينيز

338
00:25:46,790 --> 00:25:51,730
هيكون لونها غامق و هي هترسب الصبغات في منتصف

339
00:25:51,730 --> 00:25:59,390
الكلونيز البروتيز هي هتنمو على الطبق لكنها ما بتعمل 

340
00:25:59,390 --> 00:26:02,870
fermentation هيكون لونها إما colorless أو تاخد لون

341
00:26:02,870 --> 00:26:09,980
الـ media السلمونيلا السلمونيلة برضه هتنمو على الطبق

342
00:26:09,980 --> 00:26:16,000
لكنها ما بتعمل fermentation فبالتالي مش هيطلع ..

343
00:26:16,000 --> 00:26:20,480
مش .. يعني هتطلع .. هتنمو على الطبق لكن هتكون 

344
00:26:20,480 --> 00:26:23,340
colorless الاستفيلة الكوكاس اوريوس هي gram

345
00:26:23,340 --> 00:26:28,820
positive مش راح تنمو أساساً هي الإشاري شاكولاي

346
00:26:28,820 --> 00:26:32,320
الـ Metallic Sheen لإن تي روباكتر هيكون لونها pink

347
00:26:32,320 --> 00:26:38,780
أو dark purple السؤال هنا بيحكيلنا بالنسبة لـ

348
00:26:38,780 --> 00:26:42,780
lactose fermentation البروث media broth بيكون فيها

349
00:26:42,780 --> 00:26:48,900
سكر اللاكتوز for كوليفارم لو كانت عندي نامية 

350
00:26:48,900 --> 00:26:54,460
الكوليفارم هل هتكون كل التيوبات لللاكتوز البروث

351
00:26:54,460 --> 00:26:55,900
البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث

352
00:26:55,900 --> 00:26:57,120
البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث

353
00:26:57,120 --> 00:27:00,480
البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث

354
00:27:00,480 --> 00:27:00,540
البروث البروث البروث البروث البروث البروث البروث

355
00:27:00,540 --> 00:27:04,430
البروث البروتاني إشي من خلال استخدام الدرهام 

356
00:27:04,430 --> 00:27:07,710
الديوب هل هتكون positive لما أبحث عن الكوليفورم؟

357
00:27:07,710 --> 00:27:12,830
أكيد لأن الكوليفورم بتحمل fermentation للـ Lactose

358
00:27:12,830 --> 00:27:16,370
اللي في الـ media عندي وبالتالي هتكون positive

359
00:27:16,370 --> 00:27:20,570
بالنسبة للـ Biochemical tests وهي طبعا هتاخدوها

360
00:27:20,570 --> 00:27:25,150
بالتفصيل في الـ Essential Microbiology الـ Indole

361
00:27:25,150 --> 00:27:28,990
reaction كيف بعرف أنه positive بتكون حلقة لونها

362
00:27:28,990 --> 00:27:33,050
أحمر مثل الـ Red أو الـ Voges Proskauer من خلال

363
00:27:33,050 --> 00:27:37,850
تحول اللون إلى لون أحمر الـ Citrate بتحول اللون من

364
00:27:37,850 --> 00:27:42,290
أخضر إلى أزرق معناته هي إنها positive زي ما قلنا

365
00:27:42,290 --> 00:27:44,930
الأشريشيا كولاي positive positive negative negative

366
00:27:44,930 --> 00:27:48,850
الـ Enterobacter negative negative positive positive

367
00:27:48,850 --> 00:27:54,250
بالنسبة للـ Rapid Identification Kits شغلات تأكيدية

368
00:27:54,250 --> 00:27:58,530
ممكن نلجأ لاستخدام الـ ABI ممكن مثلا لاستخدام

369
00:27:58,530 --> 00:28:04,820
السيرولوجيا الجدول هذا قلنا المعمل اللي فات وهذا 

370
00:28:04,820 --> 00:28:09,020
الجدول بحتاج إلى فهم مش حفظه كيف بنتعامل مع ال

371
00:28:09,020 --> 00:28:11,960
food أول ما يصلنا، أشهر هو الـ treatment الصح وإيش

372
00:28:11,960 --> 00:28:17,100
الـ preparation لإله لو كان عندي عينة liquid milk

373
00:28:17,100 --> 00:28:21,580
water juice لـ treatment إما بعمله mix أو ب .. أو 

374
00:28:21,580 --> 00:28:26,460
بستخدم الـ stomach طب لما يكون إشي liquid بدي أعمله

375
00:28:26,460 --> 00:28:30,850
فقط shaking or mixing الـ preparation مباشرة، هي 

376
00:28:30,850 --> 00:28:34,210
يعني مافيش فيها وزنة إنما باخد باستخدام الـ pipet

377
00:28:34,210 --> 00:28:39,390
بأسحب قداش بدي volume و بحطه على الـ diluent و

378
00:28:39,390 --> 00:28:43,810
ببدأ أعمل serial dilution viscous lipids، lipid

379
00:28:43,810 --> 00:28:48,690
بنعملها shaking و بعد هيك بأوزن و بأحط على ال

380
00:28:48,690 --> 00:28:52,350
diluent بالنسبة للـ food لما يكون solid water

381
00:28:52,350 --> 00:28:56,570
soluble، solid شغلة solid لكنها بتدوب في الـ water

382
00:28:56,570 --> 00:29:02,870
زي مثلا الـ salt الملح مطحون وجاهز مش بحاجة أن أنا 

383
00:29:02,870 --> 00:29:06,750
أستخدمه لـ blender فبس علي إن أنا أعمل shaking بعد

384
00:29:06,750 --> 00:29:12,070
هيك بأوزن مقدار معين و بأحطه على الـ diluent الـ 

385
00:29:12,070 --> 00:29:18,290
powder و الـ meat لحمة بستخدم لها الـ stomacher و

386
00:29:18,290 --> 00:29:24,510
بعد هيك بأوزن و بأحطه على الـ diluent الـ cheese

387
00:29:24,510 --> 00:29:31,630
الجبنة Solid Stomacher أو بلندر بأوزن و اللي وزنته

388
00:29:31,630 --> 00:29:34,730
عشان بدي أتخلص من كل الفات اللي فيه بدي أدوبه

389
00:29:34,730 --> 00:29:38,190
بستخدم الـ multiplying agent 2% Sodium citrate قبل

390
00:29:38,190 --> 00:29:43,660
هيك بأدفيه على درجة حرارة 45 الـ spices، التوابل،

391
00:29:43,660 --> 00:29:47,080
الـ shaking، و بعدين بأوزن و بحط على الـ diluent

392
00:29:47,080 --> 00:29:50,720
الـ shellfish هو الـ fish product لـ stomach أو لـ

393
00:29:50,720 --> 00:29:56,540
blender و بأوزن بحط على الـ diluent الـ sample may

394
00:29:56,540 --> 00:30:00,440
be added into an empty stomacher bag زي فكرة

395
00:30:00,440 --> 00:30:04,660
الخلاط قلنا بدي أحط بالجار تبع لـ blender أول إشي

396
00:30:04,660 --> 00:30:09,400
عينتي بعدين بحط عليها الـ diluent و بعدين بشغل و

397
00:30:09,400 --> 00:30:10,020
بعمل mix