الآن شاء الله بدنا نحكي فيه الفحوصات المستخدمة
للكشف عن الأحماض الأمينية qualitative test of
amino acid بدنا نحكي عن الفحوصات النوعية المستخدمة
للكشف عن الأحماض الأمينية qualitative تعني نوعية
يعني هذه الفحوصات أو النتيجة اللي هتظهر عندي هتكون
عبارة عن positive أو negative يوجد أو لا يوجد
qualitative معناها فحوصات نوعية أو جودة تعطي نتيجة
positive أو negative ظهور لون أو عدم ظهور لون، لا
تعطي رقم في عندنا نوعتان من الفحوصات اللي هو
quantitative test Quantitative معناها كمية تحليل كم
يعني بديطلع عندك كمية أو مقدار يعني هيطلع عندك في
الآخر عدد تركيز بس اللي احنا هنتعرف عليه اليوم هو
qualitative test for amino acid فحوصات نوعية للكشف
عن الأحماض الأمينية في البداية نحكي مقدمة عن الأحماض
الأمينية و هذه الأشياء حكيناها في المعمل الماضي
حكينا إن الطعام ينقسم إلى ثلاثة إلى carbohydrate و
lipid و protein حكينا ال carbohydrate هو مصدر
الطاقة ال lipid هو مخزن الطاقة و ال protein هو
طاقة الخلايا لبناء الخلايا و للتجديد حكيناها المرة
الماضية برضه حكينا عن الأحماض الأمينية إنه هي عبارة
عن الوحدة البنائية للبروتين وحكينا إنها بترتبط مع
بعض بـ peptide bond حكينا الصيغة العامة للأحماض
الأمينية عبارة عن H وإن كل حمض أمين بيختلف عن
الآخر بالـ R الـ side الـ chain حكينا كمان المرة
الماضية إن الأحماض الأمينية
وين بتيجي الرابطة اللي بتبدأها؟ بين مجموعة كربوكسيل
من حمض أميني ومجموعة أمين من حمض أميني آخر يتم نزع
جزء ماء في هذه العملية فسمينا التفاعل تكون
الرابطة اللي بتبدأها بـ Condensation Reaction لأنه
بينتج عنها ماء حكينا على الأطراف بيظل عند Free
Amino Group بنسميها الـ N Terminus و Free Carboxyl
Group سميناها الـ C Terminus هنا كمان إن الأحماض
الأمينية تنقسم حسب المصدر إلى essential و non
-essential ال essential الجسم غير قادر على تصنيعها
يجب توفيرها في الوجبات ال non-essential الجسم
قادر على تصنيعها فمش ضروري تكون موجودة في الوجبات
اليومية و هنا حكينا أن أبسط حمض أميني هو ال glycine
ليش؟ لأن الـ side-chain أو الـ R-group هي عبارة عن
ذرة هيدروجين فقط و حكينا كمان أن الحمض الأمين
الشاذ أو الفريد باختلف عن غيره من الأحماض الأمينية
هو البرولين لأنه ما عندهوش amino group حرة اللي
متصلة في الـ central carbon سميناها primary amino
group في كل الأحماض الأمينية تسمى مجموعة الـ amino
group هي primary amino group أو free alpha amino
group إلا في حالة البرولين تسمى secondary amino
group أو amino group لأنها متصلة بالـ central
carbon من جهة بالـ side chain من جهة أخرى حكينا عن
الأحماض الأمينية وتقسيمها حسب ال polarity إلى polar
و non polar
charge و ال charge في منها positive charge و في
منها negative charge فهذه التقسيمة كلها سواء polar
أو non polar تعتمد على الـ side chain بتطلع على الـ
side chain حكينا حكي إن إذا في بس كربون و هيدروجين
بتكون non polar إذا فيها مجموعات قطبية بتكون polar
بتطلع إذا كانت مشحونة بتكون charge و إذا غير
مشحونة بتكون uncharged
حكينا عن هذه الصورة اللي بتقسم للأحماض الأمينية
إلى non-polar و polar ال polar في منها uncharged و
في منها charged و في positive و في negative حكينا
في أحماض أمينية بنسميها aromatic amino acid
aromatic اللي هي بتحتوي في الـ side chain على حلقة
بنزين إذا كان في الـ side chain في حلقة بنسميها
aromatic amino acid
ويجي نحكي عن حاجة اسمها Ionization Ionization
معناها كيف يتصرف الحمض الأميني في الأوساط
المختلفة، في وسط قاعدي، في وسط حمضي، في neutral،
في pH، في وسط المتعادل لو جينا و اتفرج على
المعادلة هاي اللي فوق في الوسط هذا حمض أميني موجود
في وسط متعادل الصيغة العامة لحمض أميني موجود في وسط
متعادل بتكون عدد الشحنات الموجبة بتساوي عدد الشحنات
السالبة إن هنا مكتوب CH2 هو الصيغة العامة للحمض
الأميني Central Carbon و Hydrogen و الـ R group هي
عبارة عن ذرة الهيدروجين المعتبرة هنا وإنقدش
NH3 plus و COO minus هي الصيغة العامة للحمض
الأميني في الوسط المتعادل تكون الشحنات الموجبة
بتساوي الشحنات السالبة الـ net charge بتكون
زيرو لو جيت أخدت هذا الحمض الأميني حطيته في وسط
حمضي وسط حمضي يعني قيمة الـ pH يعني أنه كان فيه
زيادة في أيونات الهيدروجين يعني هذا الوسط مليء بـ
H plus زيادة فالحمض الأميني دخله من المتعادل وحطيته
في وسط الحمضي وسط الحمضي فيه زيادة في أيونات
الهيدروجين الـ NH3 بده يحتاج الهيدروجين هياخد من
الوسط COO- محتاج الهيدروجين فبتستحب من الوسط
هيدروجين و بتتشبع بـ CRCOOH فبتصير CH2 COOH NH3 Plus
بصير الشكل العام له CH2 COOH NH3 Plus فأخذ ذرة
هيدروجينية صارت الـ net charge عليه positive charge اللي
موجودة في المعادلة على اليسار هذا اللي هو الصيغة
العامة الحمض الأميني في وسط حمضي CH2COHNH3Plus
إن الكربوكسيل أخدت أيون هيدروجين أو بروتون
هيدروجين من الوسط الحمضي اللي هي فيه فصارت COH net
charge في الوسط الحمضي صارت Positive charge طبعا لو
أخدتها الوسط من الوسط المتعادل وحطيته في وسط قاعدي
الوسط القاعدي مليء بـ OH- وسط بيكون مليء بـ OH- OH
- هي تحتاج إلى ذرة هيدروجين عشان تتكون جزئنا
فبتروح على أي ذرة جزئية بتنزع منه هيدروجين عشان
تتكوننا من عندنا بنقدر ننزع منه هيدروجين لأن NH3
plus تاخد منه هيدروجين فبصير NH2 COO minus هتتغير؟
لا مش هتتغير فالوسط المتعادل CH2 NH3 plus COO minus
لما يروح على القاعدة اللي هي على اليمين بيصير NH2
و COO minus اتغيرت من الـ NH3 نزعنا منها هيدروجين
و صارت NH2 الـ net charge إيه لو بيكون minus ففي
حالة الوسط الحمضي .. في حالة وسط متعادل الـ net
charge بتكون zero في حالة وسط حمضي بيكون الـ net
charge positive في حالة الوسط القاعدي الـ net
charge negative هلجد؟ الحمض الأميني اللي بتكون
متساوي عليه الشحنات الموجبة و الشحنات السالبة و الـ
net charge بتكون بتساوي zero بسميه Zwitterion
Zwitterion هو الحمض الأميني اللي تتساوي عليه
الشحنة الموجبة و الشحنة السالبة يعني الشحنة الكلية
تكون صفر وين موجود الـ Zwitterion؟ في الوسط
المتعادل كان موجود بالوسط المتعادل الحمض الأميني
بيكون الشحن الموجبة بتساوي الشحن السالبة يعني الشحن
الكلية بتساوي صفر وهذا بسميه Zwitterion Zwitterion
هو الحمض الأميني الذي تتساوي عليه الشحن الموجبة
والشحن السالبة و net charge Zero عند الوسط المتعادل هذا،
عند تكون الحمض الأميني اللي بتكون شحنات الموجبة
السالبة بتساوي الموجبة، في حاجة بنتسميها
isoelectric point أو الـ pH الـ pI أو الـ
isoelectric point هي قيمة pH بتتساوي عندها الشحن
الموجبة والسالبة على سطح الحمض الأميني وبالتالي،
شحنة الكلية صفر قيمة pH تتساوى عندها شحنة الموجبة
والسالبة على سطح الحمض الأمين وبالتالي، شحنة
الكلية بتساوي صفر هاي الـ Isoelectric point،
الاختصار بـ pI تمام، في حاجة بنسميها protonated
معناها إنه اكتساب بروتون أو H plus في حاجة بنسميها
Deprotonated يعني فقد بروتون اللي بياخد H plus يعني
في الوسط الحمضي زي COO minus اكتسبت H فهذه gain of
البروتون يعني صارلها protonated Deprotonated يعني
loss of البروتون زي الـ NH3 plus في الوسط القاعدة
لما حضيتها صارت NH2 نزعت منها H فبسميها .. بقول
عنها نصارلها Deprotonated فقدت البروتون
هنا بيحكي لي أن الـ Isoelectric point أو الـ PI هي
قيمة pH اللي بيكون فيها الـ anionic بتساوي الـ cationic
الـ net charge بتكون Zero كل حمض أميني له PI أو
Isoelectric point بتختلف عن غيره حسب شو؟ حسب الـ
side chain فهو حاكي أن كل حمض أميني بيميزه عن غيره
side chain
نحكي في الجزء العملي للمعمل الأول جزء العملي بيحكي
عن qualitative test for amino acid فحوصات جودة
للكشف عن الأحماض الأمينية النتيجة عندنا هتكون
positive أو negative «ظهور لون» أو «عدم ظهور لون»
في عندنا number of tests to detect the presence of
amino acid هذه الفحوصات الكاشفة عن الأحماض الأمينية
largely depend on the nature of side chain علشان
بيعتمدوا على الـ side chain لأنه حكي إن اللي بيميز
حمض أمين عن الآخر هو الـ side chain الجد إحنا
الفحوصات اللي هنشتغلها بيطلع معنا لون يتغير أو
ما يتغير هذا اللون له شدة intensity of color شدة
اللون هي بتكون تختلف يعني ممكن هو يتلون بس على
درجات من حاجة لتانية تكون درجة بتختلف شدة اللون هي
علشان بتعتمد بتعتمد على أول شيء number of reacting
unit number of reacting unit اللي هي الـ reacting
unit هي عبارة عن المادة الفعالة قد إيش عدد المادة
الفعالة الموجودة؟ إيش هي المادة الفعالة؟ دي الـ شيء
اللي بدور عليها الفحص أنا بشتغل فحص مثلا بيدور على
peptide bond إذا موجودة الـ peptide bond، يعطيني
لون إذا مش موجودة، مش هيتغير اللون طب الـ peptide
bond هذه ممكن تكون بس رابطتين، ويعطيني لون ممكن
تكون ثلاث ويعطيني لون بس هل اللون هيكون نفسه إذا
كانوا اثنتين وإذا كانوا ثلاث؟ شدة اللون هتختلف
بناء على number of reacting unit الحاجة الثانية
اللي بتعتمد عليها شدة اللون هي الـ accessibility
to reaction هل هذه المادة الفعالة الـ reacting unit
قريبة من التفاعل، هل هي حرة، free، بتقدر تيجي
ترتبط، تشتغل مع التفاعل، مع الـ agent اللي أنا
حطيته، تشتغل و تتغير اللون، ولا إنها مشغولة، مش
هتقدر في حواجز، مش هتقدر تيجي ترتبط هي بتسميها
accessibility to reaction إذا تشدت اللون تعتمد على
حاجتين على الـ number of reacting unit وعلى
accessibility to reaction إيش
هي الفحوصات اللي هنستخدمها للكشف عن الأحماض
الأمينية؟ هنا فحص اسمه ninhydrin test for 3-alpha
amino group على Free Alpha Amino Group إذا موجودة
بيتغير اللون وبيعطي positive إذا مش موجودة مش
هيتغير اللون فالـ Free Alpha Amino Group هاي
بسميها الـ Reacting Unit فحص الثاني اسمه Bio-Red 177 0
هاي سميناها primary amino group أو alpha
amino group معادة في حالة البرولين سميناها amino
groupيعني الأحماض الأمينية كلها تحتوي على free
alpha amino group ما عدا البرولين عنده amino group
يعني مين هيعطيني positive مع هذا الفحص لو أنا
اشتغلت مجموعة أحماض أمينية على هذا الفحص؟ كلهم
هيعطوني positive لأنهم كلهم بيحتوي على free alpha
amino group تمام؟ طيب، إذا ال objective to detect
the presence of free alpha amino group هل موجود
free alpha amino group أو لا؟ إذا تغير اللون يعني
موجود، إذا ما تغيرش يعني مش موجود طيب إيش ال
principle؟ مبتدأ العمل للفحص؟ كيف يشتغل الفحص؟ ال
principle لو نعملها على نظام معادلات بيسهل عليه
كيف هذا الفحص له ال principle؟ إنه عندنا amino
acid أنا بضيف حمض أميني، بضيف عليه نين هيدرين ريأشا
إيش بيعمل ال