1
00:00:01,080 --> 00:00:06,460
بسم الله الرحمن الرحيم موضوع هذه المعمل رح يكون

2
00:00:06,460 --> 00:00:09,940
الـ Osmotic Fragility Test ماذا نعني بفحص الـ

3
00:00:09,940 --> 00:00:13,480
Osmotic Fragility Test الـ Osmotic Fragility Test 

4
00:00:13,480 --> 00:00:20,000
is a measure بس أحط المشير بس is a measure of the

5
00:00:20,000 --> 00:00:23,460
ability of the red cells to take up fluid without

6
00:00:23,460 --> 00:00:28,480
lysing طيب، هذا الكلام بيخلينا نتوقف عن بعض

7
00:00:28,480 --> 00:00:32,600
المعلومات، نرجعها مع بعض طبعا يا بنات إحنا عارفين

8
00:00:32,600 --> 00:00:37,900
أن الـ Erythrocyte بتحتفظ بشكلها لو كان المحلول

9
00:00:37,900 --> 00:00:43,220
isotonic إيش يعني isotonic؟ يعني تركيز الأملاح

10
00:00:43,220 --> 00:00:48,340
بداخل الـ Erythrocyte نفس تركيز الأملاح بالـ fluid

11
00:00:48,340 --> 00:00:52,640
اللي هي محطوطة فيه قداش هذا التركيز الـ isotonic؟

12
00:00:52,640 --> 00:00:56,680
الـ isotonic solution تقريبا 85 من 100%

13
00:00:56,680 --> 00:01:03,250
صوديوم كلوريد اللي هو هذا شايفينه؟ 85 من 100 في 

14
00:01:03,250 --> 00:01:07,070
الماء Sodium Chloride إذن ننزل على الصورة اللي

15
00:01:07,070 --> 00:01:11,950
تحت الـ Isotonic solution هي عند هذا التركيز

16
00:01:11,950 --> 00:01:17,500
الخلايا تحافظ على شكلها كيف يعني تحافظ على شكلها؟

17
00:01:17,500 --> 00:01:21,620
لأ، بيطلع منها fluid ولا بدخل لها fluid يعني كمية

18
00:01:21,620 --> 00:01:24,540
السوائل اللي بتطلع منها المية اللي بتطلع نفس كمية

19
00:01:24,540 --> 00:01:27,960
المية اللي بتدخل فبالتالي بيظل شكل الـ Erythrocyte

20
00:01:27,960 --> 00:01:31,640
ثابت وهذا هو التركيز اللي ربنا خلق البلازمة فيه

21
00:01:31,640 --> 00:01:34,880
يعني البلازمة isotonic وإلا كان الـ Erythrocyte

22
00:01:34,880 --> 00:01:40,580
كلها خربت طيب، نتخيل إنه زاد تركيز المحلول اللي

23
00:01:40,580 --> 00:01:46,110
محطوطة فيه الـ RBCs هنلاحظ إن السوائل هتبدأ تطلع من

24
00:01:46,110 --> 00:01:50,090
الـ Erythrocyte الميّه هتبدأ تطلع وتصير الخلية

25
00:01:50,090 --> 00:01:54,490
تنكمش بنسميه cell shrinking زي الصورة اللي على

26
00:01:54,490 --> 00:02:03,750
الشمال طبعا؟ طيب، الآن لو تركيز المحلول انخفض يعني

27
00:02:03,750 --> 00:02:09,150
صار أقل من 85 من 100 هتبدأ السوائل تدخل في الـ

28
00:02:09,150 --> 00:02:14,850
Erythrocyte هتبدأ الخلية تنتفخ هتبدأ تصير كراوية

29
00:02:14,850 --> 00:02:20,370
Spherocyte لحد معين بعد هيك هيصيرلها Lysis

30
00:02:20,370 --> 00:02:25,050
هيصيرلها rupture لأنها ما راح تقدر تتحمل دخول

31
00:02:25,050 --> 00:02:31,890
fluids أكتر من هيك طيب اليوم احنا شغلنا في مرحلة

32
00:02:31,890 --> 00:02:36,910
من isotonic لـ hypotonic احنا

33
00:02:36,910 --> 00:02:40,370
حكينا ان الخلية في الـ hypotonic solution هتصير

34
00:02:40,370 --> 00:02:44,790
Spherocyte وبعد هيك حيصيرلها rupture طيب عند أي

35
00:02:44,790 --> 00:02:50,510
تركيز حيصير للخلية rupture؟ خلّينا نشوف خلّينا نشوف

36
00:02:50,510 --> 00:02:55,030
التركيز هذه اللي عاليمين التركيز هذه تركيز لـ

37
00:02:55,030 --> 00:03:01,790
solution Sodium Chloride يتدرج من 1% بعدين نيجي للـ

38
00:03:01,790 --> 00:03:06,760
isotonic اللي هو 85% من 100% بعد هيك بنبلش في الـ

39
00:03:06,760 --> 00:03:13,300
Hypotonic solution 75% من 100، 65% من 100، 65% من

40
00:03:13,300 --> 00:03:13,660
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

41
00:03:13,660 --> 00:03:14,420
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

42
00:03:14,420 --> 00:03:16,060
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

43
00:03:16,060 --> 00:03:16,660
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

44
00:03:16,660 --> 00:03:17,680
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

45
00:03:17,680 --> 00:03:18,460
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

46
00:03:18,460 --> 00:03:18,480
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من

47
00:03:18,480 --> 00:03:24,270
100، 65% من 100، 65% من 100، 65% من 100، وين الـ

48
00:03:24,270 --> 00:03:28,970
Erythrocyte هيصير الـ hemolysis بمعنى لو أنا دخلتها في

49
00:03:28,970 --> 00:03:32,190
محلول Hypotonic هل هيصيرلها مجرد ما المحلول يصير

50
00:03:32,190 --> 00:03:35,310
Hypotonic هل هيصير الـ hemolysis؟ احنا قولنا لأ بتدخل

51
00:03:35,310 --> 00:03:39,010
في مرحلة Spherocytosis وبعدها تصير الـ hemolysis يعني

52
00:03:39,010 --> 00:03:46,370
مثلا هل عند 75%؟ هل عند 65%؟ لأ عند 60%؟ عند 55%؟

53
00:03:46,370 --> 00:03:50,990
طيب السؤال عند أي تركيز بيصير الـ hemolysis بيصير

54
00:03:50,990 --> 00:03:55,940
Hemolysis للخلايا؟ عند أي تركيز طبعاً هذا بيعتمد

55
00:03:55,940 --> 00:04:00,800
على الخلايا نفسها يعني مش كل الخلايا هيصيرلها

56
00:04:00,800 --> 00:04:06,400
hemolysis عند نفس النقطة يعني يا بنات قولوا معايا أن

57
00:04:06,400 --> 00:04:11,720
الخلايا الـ Normal مثلا بيصيرلها hemolysis عند 40

58
00:04:11,720 --> 00:04:18,600
يعني هي بتظل مقاومة للـ Hypotonic solution مقاومة

59
00:04:18,600 --> 00:04:23,060
للتخفيف وتنتفخ وتصير Spherocyte مثلًا عند 40 مش

60
00:04:23,060 --> 00:04:27,540
هتقدر تقاوم هيصيرلها Rupture تمام؟ طيب تخيلوا

61
00:04:27,540 --> 00:04:33,280
معايا خلية أصلا هي Spherocyte أصلا هي منتفخة طيب

62
00:04:33,280 --> 00:04:36,600
الخلية الـ Spherocyte عند وين هيصيرلها lysis؟ أكيد

63
00:04:36,600 --> 00:04:40,920
هيصيرلها قبل يعني هتكون أقل مقاومة للمحلول الـ

64
00:04:40,920 --> 00:04:45,960
Hypotonic صح؟ أقل مقاومة لدخول السوائل فيها مظبوط؟

65
00:04:45,960 --> 00:04:51,480
بمعنى إنها more fragile إنها هشة أكثرواضحة الصورة

66
00:04:51,480 --> 00:04:56,900
هذه؟ يعني إحنا ببساطة بدنا نشوف لما المحلول يتحول

67
00:04:56,900 --> 00:05:01,360
من isotonic لـ hypotonic وين الخلية بده يبدأ يصير

68
00:05:01,360 --> 00:05:05,040
لها lysis باعتمد على عوامل هالأت راح ندرسها مع

69
00:05:05,040 --> 00:05:09,780
بعض، تمام؟ تفهم؟ نشوف كمان مرة التعريف الـ Osmotic

70
00:05:09,780 --> 00:05:13,320
Fragility Test is a measure of the ability of the

71
00:05:13,320 --> 00:05:18,020
red cells قدرة الخلايا إنها تاخد fluid without

72
00:05:18,020 --> 00:05:24,700
lysing to take up fluid without lysing تمام؟ or it

73
00:05:24,700 --> 00:05:28,840
is a test to measure red blood cell resistance to

74
00:05:28,840 --> 00:05:33,720
hemolysis ممكن أقاس مقاومة الخلايا للـ hemolysis

75
00:05:33,720 --> 00:05:39,040
when exposed لما بنعرضها لـ series of increasingly

76
00:05:39,040 --> 00:05:44,700
dilute saline dilution يعني لما بعمل saline مخفف

77
00:05:45,020 --> 00:05:50,860
طبعا بالتدريج بدي أشوف قدرة الخلايا على مقاومة هذا

78
00:05:50,860 --> 00:05:54,770
الـ Hypotonic solution لوين راح توصل طبعًا مش كل

79
00:05:54,770 --> 00:05:58,250
الخلايا هتقاوم بنفس الدرجة في خلايا حيصر

80
00:05:58,250 --> 00:06:02,590
الـ Hemolysis عند 65 وفي خلايا حيصر الـ Hemolysis بعدين

81
00:06:02,590 --> 00:06:07,110
عند 30 مثلًا فهذا موضوعنا اليوم Osmotic Fragility

82
00:06:07,110 --> 00:06:14,370
مدى هشاشية أو حساسية الخلية لتغير أو انخفاض الضغط

83
00:06:14,370 --> 00:06:19,110
الأسمازي لسائل المحيط في الخلية أو مدى مقاومتها

84
00:06:19,110 --> 00:06:24,370
لتغير الضغط الأسمازي عندما توضع في محاليل متناقصة

85
00:06:24,370 --> 00:06:26,930
من ناحية الشكل إيش هي العوامل اللي بتأثر على الـ

86
00:06:26,930 --> 00:06:30,770
Osmotic Fragility؟ طبعا الـ Fragility هنا بدنا نفهم

87
00:06:30,770 --> 00:06:35,530
إنها هشاشية هي عكس الـ Resistance عكس المقاومة يعني

88
00:06:35,530 --> 00:06:38,750
الخلية اللي بتكون more fragile يعني دُغري بتتسر

89
00:06:38,750 --> 00:06:43,330
بتكون أقل مقاومة less resistant The primary factor

90
00:06:43,330 --> 00:06:47,190
affecting the osmotic fragility test is the shape

91
00:06:47,190 --> 00:06:51,550
of red cell which in turn depend on يعني بتعتمد

92
00:06:51,550 --> 00:06:58,170
بشكل أساسي على الشكل بتاع الخلية الشكل يعني إله

93
00:06:58,170 --> 00:07:02,250
علاقة بشغلتان بالـ volume والـ surface area عدنا

94
00:07:02,250 --> 00:07:06,630
راح نفهم كيف شغل تانية بتعتمد عليها مهمة جدا اللي

95
00:07:06,630 --> 00:07:09,670
هي الـ functional state of cell membrane هل الـ

96
00:07:09,670 --> 00:07:12,990
Cell Membrane تاع الخلية هذه تعبان؟ هل في مشكلة؟

97
00:07:12,990 --> 00:07:19,030
ولا هو طبيعي؟ خلّينا نشوف تفصيل العوامل هذه بعدين

98
00:07:19,030 --> 00:07:25,650
أول حاجة اللي هو الـ Shape قلنا الـ Surface to

99
00:07:25,650 --> 00:07:30,490
Volume Ratio أكيد يا بنات كل ما كانت الخلية

100
00:07:30,490 --> 00:07:35,750
Surface Area إلها كبيرة مقارنة بالـ Volume هيكون

101
00:07:35,750 --> 00:07:39,990
عندها فرصة أكبر إنها تفرد وتصير Spherocyte قبل ما

102
00:07:39,990 --> 00:07:44,410
يصير الـ Hemolysis يعني هتكون more resistant and

103
00:07:44,410 --> 00:07:49,730
less fragile إذن increased surface to volume ratio

104
00:07:49,730 --> 00:07:54,450
يعني بدياكي ببساطة تتخيل تنتين، two cells واحدة

105
00:07:54,450 --> 00:07:59,270
فيهم Target cell Target cell سطحة مجعد، ليش؟ لأن

106
00:07:59,270 --> 00:08:05,610
فيها أكثر من نتوق و Spherocyte مين فيهم هتتحمل دخول

107
00:08:05,610 --> 00:08:09,910
السوائل أكتر؟ أكيد هتقولي ليه الـ Target سلب صح؟

108
00:08:09,910 --> 00:08:13,270
ليش؟ لأن الـ Surface Area للـ Target Cell كبيرة

109
00:08:13,270 --> 00:08:17,010
يعني مساحة سطحة كبيرة فبالتالي راح تتحمل دخول

110
00:08:17,010 --> 00:08:21,470
Fluids أكتر من الـ Spherocyte لذن كل ما زادت الـ

111
00:08:21,470 --> 00:08:25,290
Surface Area بتكون الخلية more resistant to

112
00:08:25,290 --> 00:08:29,090
Hemolysis and has decreased fragility والـ

113
00:08:29,090 --> 00:08:33,260
Fragility إلها هتكون أقل The larger the amount of

114
00:08:33,260 --> 00:08:36,680
red cell membrane كل ما كان الممبران أكبر يعني ال

115
00:08:36,680 --> 00:08:40,340
surface area أكتر in relation to the size of the

116
00:08:40,340 --> 00:08:44,280
cell the more fluid is the cell capable to

117
00:08:44,280 --> 00:08:47,580
absorbing before rupturing يعني الخلية بتقدر

118
00:08:47,580 --> 00:08:52,160
تستوعب الـ fluid أكتر لما يصير لها rupture طيب إيش

119
00:08:52,160 --> 00:08:55,700
في عندي حالات؟ أول حاجة Iron deficiency anemia إيش

120
00:08:55,700 --> 00:09:00,870
علاقة Iron deficiency anemia؟ خلية محتواها من الـ

121
00:09:00,870 --> 00:09:05,630
Hemoglobin قليل يعني الخلايا هتكون الـ Halo Area

122
00:09:05,630 --> 00:09:08,850
فيها في الوسط كبيرة يعني الـ Surface Area هتكون

123
00:09:08,850 --> 00:09:12,970
إلها كبيرة بمعنى إن الخلية هتستوعب الـ Fluids كثير

124
00:09:12,970 --> 00:09:16,790
إذن هذه الخلايا في الـ Iron Deficiency Anemia

125
00:09:16,790 --> 00:09:21,330
هتكون الـ Fragility إلها قليلة والـ Resistance

126
00:09:21,330 --> 00:09:25,970
إلها عالية هتتحمل دخول Fluid لأن الخلايا أصلا

127
00:09:25,970 --> 00:09:30,620
فاضية من جوا Thalassemia لأن فيها Target Cell كتير

128
00:09:30,620 --> 00:09:35,400
السلّيمية صح وبعدين Hypochromic بتكون Sickle Cell

129
00:09:35,400 --> 00:09:39,980
Anemia شكل الخلية الـ Sickle Cell لها Surface Area

130
00:09:39,980 --> 00:09:44,480
كبيرة فبالتالي بتتحمل دخول Fluids كتير Liver

131
00:09:44,480 --> 00:09:47,460
Disease Liver Disease ليش؟ لأنها بتتميز بوجود

132
00:09:47,460 --> 00:09:51,880
Target Cells عدد كبير فكل مكان فيه Target Cells

133
00:09:51,880 --> 00:09:56,540
هتكون الـ Fragility فيه قليلة والـ Resistance عالية

134
00:09:56,930 --> 00:10:00,430
تمام؟ إذن أول عامل increase surface to volume

135
00:10:00,430 --> 00:10:03,830
ratio فحكينا الأمثلة الـ target cell والـ

136
00:10:03,830 --> 00:10:07,470
hypochromic cells والـ sickle cells هنا هدول بتكون

137
00:10:07,470 --> 00:10:11,710
الـ fragility فيهم قليلة والـ resistance عالية الـ

138
00:10:11,710 --> 00:10:14,570
resistance لاقاش لدخول لـ fluids في الخلية بدون ما

139
00:10:14,570 --> 00:10:18,530
يصير الـ hemolysis يعني كل ما دخل fluid فيها هتفرد

140
00:10:18,530 --> 00:10:19,850
أكتر وتتحمل أكتر

141
00:10:22,990 --> 00:10:26,190
الـ target cell has the largest surface area

142
00:10:26,190 --> 00:10:29,150
amount of membrane for its size and therefore

143
00:10:29,150 --> 00:10:32,170
shows decreased fragility هنا بقولك الـ target cell

144
00:10:32,170 --> 00:10:36,910
أكبر surface area as the red cell takes in fluid

145
00:10:36,910 --> 00:10:40,070
it becomes more round يعني زي ما قولنا المرحلة

146
00:10:40,070 --> 00:10:43,550
الأولى الخلية بتاخد fluid بتصير دائرية بتصير

147
00:10:43,550 --> 00:10:48,530
spherocyte بعد الـ spherocytosis بيصير الـ rupture

148
00:10:48,530 --> 00:10:59,240
طيب it therefore follows that الـ Spherocyte لها

149
00:10:59,240 --> 00:11:04,460
أصغر surface area ما بين الخلايا عشان هيك rupture

150
00:11:04,460 --> 00:11:07,560
بسرعة أسرع واحدة يصللها rupture اللي هي الـ

151
00:11:07,560 --> 00:11:11,660
Spherocyte لأنه لها fragility عالية حساسيتها

152
00:11:11,660 --> 00:11:17,220
للسائل أو هشاشتها عالية لتخفيف الملح في السائل

153
00:11:18,260 --> 00:11:22,960
عشان هيك هذا الفحص يستخدم بشكل أساسي لتشخيص حالات

154
00:11:22,960 --> 00:11:27,800
الـ Spherocytosis التشخيص الصحيح للـ Spherocytosis

155
00:11:27,800 --> 00:11:37,060
بيجي من خلال الـ Osmotic Fragility Test Decreased

156
00:11:37,060 --> 00:11:41,120
Surface to Volume Ratio Increased Osmotic

157
00:11:41,120 --> 00:11:44,900
Fragility and Decreased Resistance وين بشوفه؟ في

158
00:11:44,900 --> 00:11:48,230
حالات الـ Hemolytic Anemia حالات الـ Hereditary

159
00:11:48,230 --> 00:11:52,890
Spherocytosis وفي كل حالة بلاقي فيها Spherocyte

160
00:11:52,890 --> 00:11:57,030
طيب

161
00:11:57,030 --> 00:12:00,950
الشغل التالتة اللي هي مهمة جدا الـ functional

162
00:12:00,950 --> 00:12:05,430
state of cell membrane الـ functional state يعني

163
00:12:05,430 --> 00:12:08,750
قد إيش عمر الـ RBCs يعني في RBCs عمرها يوم في RBCs

164
00:12:08,750 --> 00:12:12,930
عمرها 120 يوم أكيد اللي عمرها يوم هتتحمل أكتر من

165
00:12:12,930 --> 00:12:18,550
اللي عمرها 120 يوم طيب إذا وين فيه reticulocyte؟

166
00:12:18,550 --> 00:12:23,330
هتكون المقاومة عالية والـ fragility قليلة تمام؟

167
00:12:23,330 --> 00:12:26,550
the aged erythrocyte will be hemolyzed easily

168
00:12:26,550 --> 00:12:30,110
hence the more healthy cell membrane، the less

169
00:12:30,110 --> 00:12:32,990
fragile cells، such as reticulocyte أفهمنا

170
00:12:32,990 --> 00:12:35,430
reticulocyte، reticulocyte يبارك عن young cell

171
00:12:35,430 --> 00:12:39,050
فبالتالي المقاومة بتكون عالية والـ fragility قليلة

172
00:12:39,050 --> 00:12:43,710
طيب، قالت splenectomy، طب شو علاقة splenectomy

173
00:12:43,710 --> 00:12:49,310
بالموضوع؟ هلأ أنتو عارفين إنه الخلايا لما بتمر عبر

174
00:

216
00:15:37,400 --> 00:15:41,320
درجة الحرارة بعد هيك طبعا هنا بوضح لك في ال

217
00:15:41,320 --> 00:15:44,300
صورة هذه الـ isotonic الخلايا إيش 

218
00:15:44,300 --> 00:15:46,640
بيصير فيها، و شرحناها ده، و الـ hypertonic و

219
00:15:46,640 --> 00:15:51,780
الـ hypotonic بعد ما بحط الخلايا يعني أنا بجيب تركيز

220
00:15:51,780 --> 00:15:55,420
مختلفة، بحط الخلايا فيها، بعد فترة معينة من ال

221
00:15:55,420 --> 00:16:00,000
incubation تمام بشوف أديه صار hemolysis في كل

222
00:16:00,000 --> 00:16:04,480
واحدة من هذه الأنابيب، كيف بعرف الـ hemolysis، نفهم

223
00:16:04,480 --> 00:16:07,360
كيف، هنقرأ الـ Hemolysis على الـ Spectrophotometer

224
00:16:07,360 --> 00:16:10,460
ونعرف درجة الـ Hemolysis اللي صارت في كل أنبوبة من

225
00:16:10,460 --> 00:16:14,840
الأنابيب هذه الطريقة،

226
00:16:14,840 --> 00:16:21,380
بدي أحضر الـ Dilution هذا كيف؟ تلعبوا معايا إيش

227
00:16:21,380 --> 00:16:26,220
بلزمني؟ بلزمني Buffered Sodium Chloride تركيزه 1%

228
00:16:26,220 --> 00:16:34,430
وبلزمني Distilled Water، نيح؟ هلقيت؟ بحضر عندي 14

229
00:16:34,430 --> 00:16:44,570
تيوب، 14 تيوب تمام؟ و الـ 14 هدول برقمهم من 1 إلى 14

230
00:16:44,570 --> 00:16:50,330
شو بدي أعمل فيهم؟ باجي على الـ tube الأول باخد من

231
00:16:50,330 --> 00:16:55,330
الـ Sodium Chloride اللي تركيزه 1%، 10 ML يعني قداش

232
00:16:55,330 --> 00:16:59,130
تركيز الأنبوبة هيكون 1%، أنا ما عملت أي تخفيف، ما ضفتش 

233
00:16:59,130 --> 00:17:04,920
أي حاجة، تمام؟ باجي بعمل أنبوبة تانية، باخد 8.5 ML من

234
00:17:04,920 --> 00:17:09,860
السوديا كلوريد، بحط عليها 1.5 ML Distilled Water

235
00:17:09,860 --> 00:17:16,900
تمام؟ تخفيف قداش هيصير؟ 85%، لأن أنا أخدت 8.5 و كملتهم 

236
00:17:16,900 --> 00:17:21,140
1.5 مل Distilled Water فهيكون التخفيف 85%، خدوا بالك

237
00:17:21,140 --> 00:17:25,920
لغاية هنا Isotonic Saline، هلقيت بعد هيك هبدأ أدخل

238
00:17:25,920 --> 00:17:30,420
في الـ Hypotonic Saline كيف بدي أحضر؟ بجيب زي ما 

239
00:17:30,420 --> 00:17:37,020
انتوا شايفين 7.5 Sodium Chloride إلى 2.5 مية، 6.5 

240
00:17:37,020 --> 00:17:42,320
إلى 3.5، 6 إلى .. هذه غلطة على فكرة هذه 4 مش 5، 5.5

241
00:17:42,320 --> 00:17:48,620
إلى 4.5 هيك بكون شغلت على الـ 14 يوم، قدرت فيهم هذه

242
00:17:48,620 --> 00:17:55,200
التخفيفات، الأنبوبة الأولى 1%، 85 من 100%، 75 من 100%

243
00:17:55,760 --> 00:17:59,680
لآخره، لغاية ما أوصل لأخر أمبوبة، على فكرة هي مش

244
00:17:59,680 --> 00:18:03,640
مبينة بالعرض، أخر أمبوبة تركيزها Zero Zero يعني 

245
00:18:03,640 --> 00:18:06,800
هيكون فيها ميّه لحالها مش هيكون فيها حاجة تانية

246
00:18:06,800 --> 00:18:14,000
غير الميّه، طيب، الأكثر عندي 14 أمبوبة كل أمبوبة

247
00:18:14,000 --> 00:18:19,180
فيها عشان 10 ML من التركيز اللي أنا بديها، كل

248
00:18:19,180 --> 00:18:23,940
أمبوبة فيها 10 ML من التركيز اللي أنا بديها، طيب

249
00:18:23,940 --> 00:18:29,840
الآن كيف .. يعني كيف بدي أعمل الخطوة اللي بعد هيك؟

250
00:18:29,840 --> 00:18:34,960
بدي أجيب كمان 14 أنبوبة على rack تانية، كويس؟ بعد ما

251
00:18:34,960 --> 00:18:38,980
أعمل mixing، و أحضر التركيزات هذه، بدي كل أنبوبة من

252
00:18:38,980 --> 00:18:43,180
هدول أقسمها نصين، كيف يعني؟ أجل الأنبوبة الأولى

253
00:18:43,180 --> 00:18:47,000
اللي تركيزها واحد، آخد منها 5 ML في الأنبوبة

254
00:18:47,000 --> 00:18:50,980
التانية اللي رقمها واحد، أجعل الأنبوبة التانية اللي

255
00:18:50,980 --> 00:18:55,120
تركيزها 85 من 100، آخد منها 5 ML على الأنبوبة رقم 2

256
00:18:55,120 --> 00:19:00,080
الأنبوبة رقم 3، خمسة ML على الأنبوبة رقم 3، هيك إيش

257
00:19:00,080 --> 00:19:05,000
بيصير معايا؟ بيصير عندي 14 و 14، كأنه Duplicate يعني

258
00:19:05,000 --> 00:19:09,680
كل واحدة منها نتين فيهم خمسة ML من التركيز اللي

259
00:19:09,680 --> 00:19:13,820
أنا بديها يعني كل عشرة حضرتهم قسمتهم نصين، طب إيش

260
00:19:13,820 --> 00:19:16,600
الهدف من الكلام هذا؟ إنه كل عينة بدأت شغلها مرتين

261
00:19:16,600 --> 00:19:20,700
زيادة تأكيد للنتيجة، بسفبالتالي بعد ما حضرت العشرة

262
00:19:20,700 --> 00:19:25,800
بقسمهم من النص 5 5 في كل واحدة فبيكون عندي 14 14

263
00:19:25,800 --> 00:19:31,220
متماثلين يعني من 1 ل 14 من 1 ل 14 أنا بيب نفس

264
00:19:31,220 --> 00:19:36,840
التركيز كل واحدة فيهم فيها 5 ML من المحلول اللي 

265
00:19:36,840 --> 00:19:41,640
أنا حضرته بالتركيز المطلوب، تمام هيك؟ طيب، إذا أنا

266
00:19:41,640 --> 00:19:45,540
أول خطوة حضرت التخفيفات، إيش بعد هيك بدي أعمل؟ بدي

267
00:19:45,540 --> 00:19:49,060
أضيف عليهم الخلايا عشان أشوف وين الخلايا بدأت تكسر

268
00:19:49,060 --> 00:19:53,600
تمام

269
00:19:53,600 --> 00:19:58,280
هي زي ما قلنا بننقل 5 ml بعد هيك باجي باخد 50

270
00:19:58,280 --> 00:20:03,440
microliter على كل أمبوبة من الـ blood، 50 microliter

271
00:20:03,440 --> 00:20:10,120
على كل أمبوبة من الـ 28 أمبوبة، بعمل good mixing، كيف 

272
00:20:10,120 --> 00:20:13,800
الـ mixing؟ بدي أعمله by gentle inversion يعني بديش

273
00:20:13,800 --> 00:20:17,370
أعمل mix جامد بحيث أنه مثلًا الـ mix نفسه يؤثر

274
00:20:17,370 --> 00:20:20,230
ويعمل Hemolysis، أنا بدي الـ Hemolysis يكون بسبب

275
00:20:20,230 --> 00:20:25,610
اختلاف الضغط الأسموزي مش بسبب أي عوامل أخرى، بعد ما

276
00:20:25,610 --> 00:20:30,770
أعمل mix ما بدي أسوي بترك الأنابيب تلاتين دقيقة في

277
00:20:30,770 --> 00:20:34,970
الـ room temperature، بعد هيك بعمل mix كمان مرة و

278
00:20:34,970 --> 00:20:39,430
بعمل centrifuge، هلقيت بعد الـ centrifuge شوفوا

279
00:20:39,430 --> 00:20:44,700
معايا إيش بده يطلع، centrifuge خمس دقائق لما نطلع

280
00:20:44,700 --> 00:20:48,360
الأنابيب من الـ centrifuge راح نشوف هذا الشكل إيش 

281
00:20:48,360 --> 00:20:52,540
فعليًا اللي إحنا شايفينه، من الشمال بنبدأ الأنبوب

282
00:20:52,540 --> 00:20:57,640
رقم 1 اللي هو فيه أعلى تركيز، وكل ما اتجهنا لليمين

283
00:20:57,640 --> 00:21:02,980
التركيز بيكون للـ isotonic الـ saline بيكون أقل، طيب

284
00:21:02,980 --> 00:21:06,680
الأنابيب الأولى لو لاحظنا هنلاقي خلايا مترسبة تحت 

285
00:21:06,680 --> 00:21:13,610
و سائل clear ما فيش فيه أي لون، أول أمبوبة، تاني واحدة

286
00:21:13,610 --> 00:21:16,450
و تالت واحدة، طيب على إيش بدل هذا السائل الـ Clear

287
00:21:16,450 --> 00:21:21,390
طالما السائل Clear و ما صار فيه تلون، معناته إنه

288
00:21:21,390 --> 00:21:26,250
ما صار Hemolysis، إمتى ببدأ الـ Hemolysis يصير لما

289
00:21:26,250 --> 00:21:30,910
يصير تلون في السائل، الآن التلون هذا بدل على إن الـ

290
00:21:30,910 --> 00:21:34,550
Hemoglobin طلع من الخلايا و عمل تلوين للـ

291
00:21:34,550 --> 00:21:40,210
Supernatant، معنى الكلام إنه العينة اللي عندي تحملت

292
00:21:40,570 --> 00:21:44,970
تخفيف التركيز في هذه الأنبوبة، و في هذه لغاية 

293
00:21:44,970 --> 00:21:48,430
الأنبوبة هذه، هنا بيكون فعليًا بدأ الـ Lysis

294
00:21:48,430 --> 00:21:53,590
تمام؟ ممكن أنا أقرأ درجة الـ Lysis عن طريق قراءة 

295
00:21:53,590 --> 00:21:58,830
هذا اللون باستخدام الـ Spectrophotometer، هيك في

296
00:21:58,830 --> 00:22:03,650
هذا الاتجاه كل ما توجهنا في هذا الاتجاه فهيزيد الـ

297
00:22:03,650 --> 00:22:08,010
Lysis هيزيد في أمبوبة تلت أربع قنابيب بعد هيك

298
00:22:08,010 --> 00:22:11,550
هنلاقي ثابت في اللون، إيش يعني صار ثابت في اللون؟

299
00:22:11,550 --> 00:22:14,630
ثابت في اللون إنه صار Complete Hemolysis يعني مثلًا

300
00:22:14,630 --> 00:22:18,930
لو أجيت قرأت أخر أمبوبة تاني نفس القراءة هيكونوا أخر 

301
00:22:18,930 --> 00:22:22,610
نتين تمل الـ Hemolysis فيهم يعني كل الخلايا صار

302
00:22:22,610 --> 00:22:26,770
فيها Hemolysis، أنا فعليًا باجي أول أمبوبة صار فيها

303
00:22:26,770 --> 00:22:30,570
Lysis خفيفة تلاقي اللي بعدها أكثر طبعًا بستدل عليه

304
00:22:30,570 --> 00:22:33,750
من خلال قراءة الـ Spectrophotometer اللي بعدها

305
00:22:33,750 --> 00:22:37,610
أكثر لغاية ما آخر أنابيب هتلاقي الـ Lysis ثبت يعني 

306
00:22:37,610 --> 00:22:42,830
صار 100% للخلايا Lysis، طيب خلينا نقارن الحالة هذه

307
00:22:42,830 --> 00:22:47,250
بالحالة اللي تحتها، الحالة التانية، الأنبوب الأولى

308
00:22:47,250 --> 00:22:51,650
ما صار فيها Lysis بس بعد هيك صار Lysis، معنى الكلام

309
00:22:51,650 --> 00:22:56,050
أن الخلايا اللي أنا ضفتهم في المجموعة التانية هدول

310
00:22:56,050 --> 00:23:00,860
الخلايا more fragile، less resistant، ما تحملت

311
00:23:00,860 --> 00:23:06,280
تخفيف اللي هو تركيز الملح، قد تكون هذه الخلايا

312
00:23:06,280 --> 00:23:10,740
Spherocyte، عشان هيك بدأ الـ Lysis فيها مبكراً، وهذا 

313
00:23:10,740 --> 00:23:14,280
الفرق ما بين الـ Normal و ما بين الـ Spherocyte الـ

314
00:23:14,280 --> 00:23:18,020
Normal بيبدأ الـ Lysis متأخر، بينما الـ Spherocyte

315
00:23:18,020 --> 00:23:24,610
بيبدأ الـ Lysis مبكر، إذن بعد هيك أنا طلعت القنابيب

316
00:23:24,610 --> 00:23:27,390
و قلت لكم إيش الموجود في القنابيب، بدي أخد القراءة

317
00:23:27,390 --> 00:23:31,450
540 نانومتر، إيش بدي أخد قراءته، الـ Supernatant، كل

318
00:23:31,450 --> 00:23:35,390
الـ Supernatant هذا بدي أقرأه، أسجل رقم لـ tube

319
00:23:35,390 --> 00:23:39,130
و آخد قراءة الـ Supernatant أسجله جنبها الـ

320
00:23:39,130 --> 00:23:44,290
Absorbance إلها حيصير عندي 14 قراءة و 14 قراءة،

321
00:23:44,290 --> 00:23:48,570
تمام؟ طيب، بنشوف بعدين إيش بدنا نعمل حاجة اسمها

322
00:23:48,570 --> 00:23:52,960
الـ Percent Hemolysis، إيش هو الـ Percent Hemolysis؟

323
00:23:52,960 --> 00:23:57,300
بمعنى قداش صار Hemolysis في كل أنبوبة من هذه 

324
00:23:57,300 --> 00:24:02,300
الأنابيب كيف؟ عن طريق الـ Absorbance لكل أنبوبة

325
00:24:02,300 --> 00:24:07,100
على أحدها، على الـ Absorbance لأنبوبة 14، طب ليش

326
00:24:07,100 --> 00:24:11,300
اختارنا Absorbance لأنبوبة 14؟ لأنه صار فيها

327
00:24:11,300 --> 00:24:15,950
Complete Hemolysis يعني 100% Hemolysis، فأنا بدي 

328
00:24:15,950 --> 00:24:20,290
أشوف مثلًا أنبوبة رقم 4 أو 5 يعني بدي أشوف الـ

329
00:24:20,290 --> 00:24:23,210
Absorbance اللي لها، الـ Absorbance ده على 14 يعني نسبة 

330
00:24:23,210 --> 00:24:26,130
الـ Hemolysis اللي صار فيها للـ Total Hemolysis في

331
00:24:26,130 --> 00:24:30,370
100% فأكون حسبت نسبة الـ Hemolysis لكل أنبوبة على

332
00:24:30,370 --> 00:24:34,830
حدة The results of the test may then be graphed 

333
00:24:34,830 --> 00:24:38,490
with the percent Hemolysis on the vertical axis

334
00:24:38,490 --> 00:24:42,370
and the Sodium Chloride concentration على الـ X 

335
00:24:42,370 --> 00:24:50,050
-axis خلينا نشوف الرسمة، بتوقع تطلع معايا، تطلع

336
00:24:50,050 --> 00:24:54,050
معايا هنا نسبة الـ Hemolysis اللي أنا حسبتها لكل

337
00:24:54,050 --> 00:24:59,270
أنبوبة، الـ Percent Hemolysis تمام، و هنا تركيز الـ

338
00:24:59,270 --> 00:25:04,250
Sodium Chloride، هنا تركيز Sodium Chloride لو أخذته

339
00:25:04,250 --> 00:25:09,550
بالكم هو بدأ التركيز من هنا يعني الأنبوبة رقم 1

340
00:25:09,550 --> 00:25:14,070
على اليمين و راح للشمال عشان الـ curve طلع معايا زي

341
00:25:14,070 --> 00:25:18,190
ما انتوا شايفين في الأول ما فيش Hemolysis ما فيش

342
00:25:18,190 --> 00:25:22,150
ما فيش Hemolysis بعد هيك بدأ الـ Hemolysis يزيد

343
00:25:22,150 --> 00:25:26,830
لغاية و ارتفع، القنابيب هذه هي اللي بيزيد فيها الـ

344
00:25:26,830 --> 00:25:31,010
Hemolysis، هنلاحظ ارتفاع شديد في الـ percent أو نسبة 

345
00:25:31,010 --> 00:25:35,540
الـ Hemolysis بعد هيك هنلاقي ثبات في القراءة، قلت لكم

346
00:25:35,540 --> 00:25:39,780
آخر قنابيب بيصير فيها ثبات في القراءة وهذا شكل الـ

347
00:25:39,780 --> 00:25:44,680
curve و بتقولولي ليش خطين؟ لأنه احنا فعليًا عملنا 

348
00:25:44,680 --> 00:25:49,520
مجموعتين من القنابيب ماشي فممكن احنا نرسم لكل

349
00:25:49,520 --> 00:25:52,920
مجموعة curve أو نجيب المتوسط و نرسم curve واحد 

350
00:25:52,920 --> 00:25:56,100
صعبوا

351
00:25:56,100 --> 00:26:00,340
معايا، هي الـ Normal، normally الـ Hemolysis ببدأ 

352
00:26:00,340 --> 00:26:06,670
ما بين اللي هو خمسة و خمسين تقريبًا، و بنتي عند خمسة

353
00:26:06,670 --> 00:26:09,230
و أربعين هي الـ Normal، شايفينه؟ اللي في الوسط

354
00:26:09,230 --> 00:26:14,210
الحالات الـ Hereditary الـ Spherocytosis هيبدأ الـ

355
00:26:14,210 --> 00:26:18,450
Hemolysis قبل، ممكن يبدأ من خمسة و ستين من مية، حالات

356
00:26:18,450 --> 00:26:22,110
الـ Sickle Cell Anemia و الحالات اللي بتقل فيها الـ

357
00:26:22,110 --> 00:26:25,730
Fragility و الثلاسيميا و الـ Iron Deficiency هتلاقي 

358
00:26:25,730 --> 00:26:30,450
بعد يمكن عند خمسة و أربعين من مية أو أقل بدأ الـ

359
00:26:30,450 --> 00:26:30,890
Hemolysis

360
00:26:37,470 --> 00:26:41,890
طيب، في عندنا بعض النقاط لازم ناخد بالنا منها، معظم 

361
00:26:41,890 --> 00:26:45,390
النقاط هذه بتركز على شغل واحدة إنه أنا بدي الـ 

362
00:26:45,390 --> 00:26:49,230
Hemolysis يكون فعلاً جاي بسبب تغير تركيز الأملاح

363
00:26:49,230 --> 00:26:53,890
Hemolysis اسموزي ما إله علاقة بأي عوامل إضافي، قدّت 

364
00:26:53,890 --> 00:26:57,810
للـ Hemolysis، إذن أحيانًا بيكون Hemolytic organism

365
00:26:57,810 --> 00:27:03,290
في الـ Sample بتعمل عندي False Result، طيب، هنا في 

366
00:27:03,290 --> 00:27:06,700
عندي شغلة، في حالات الـ Severe Anemia or other

367
00:27:06,700 --> 00:27:11,040
conditions، حالات أنيميا أو حالات فيها عدد الـ RBCs

368
00:27:11,040 --> 00:27:14,520
قليلة ممكن تبقى النتائج عندي مش كتير دقيقة

369
00:27:14,520 --> 00:27:17,340
فبالتالي هو بقولك لو كان في عندنا Severe Anemia

370
00:27:17,340 --> 00:27:20,580
ممكن أنا أزود كمية الـ blood على كل الأنابيب يعني 

371
00:27:20,580 --> 00:27:25,180
احنا قلنا 50 لكن لو كانت حالة Severe Anemia عشان

372
00:27:25,180 --> 00:27:28,480
أحصل على نتائج أفضل، بزود كمية الـ blood، مثلًا ممكن

373
00:27:28,480 --> 00:27:32,340
آخد 70، 80، بس على كل الأنابيب نفس الكمية باخد عشان

374
00:27:32,340 --> 00:27:37,040
أزود كمية الـ RBCs و القراءة تكون إيه كويسة؟ حالات

375
00:27:37,040 --> 00:27:40,000
الـ Recent Blood Transfusion واحد لما بينقل له دم

376
00:27:40,000 --> 00:27:43,680
جديد، طبعًا الدم بيبقى فيه نسبة من الـ RBCs، الدم 

377
00:27:43,680 --> 00:27:47,840
المخزن في التلجات عند نقل الدم بيبقى نسبة من الـ 

378
00:27:47,840 --> 00:27:52,380
RBCs اتسرت صار لها Hemolysis، هذه لما تدخل للدم لو 

379
00:27:52,380 --> 00:27:56,380
أنا جيت سحبت عينة مباشرة بعد نقل الدم ممكن يكون 

380
00:27:56,380 --> 00:28:00,040
فيه نسبة Hemolysis جاية من نقل الدم، لو كانت العينة

381
00:28:00,040 --> 00:28:04,370
Old بر