1 00:00:00,350 --> 00:00:05,590 أكمل فيما يتعلق بـ Media المكونك أجار نستخدمها 2 00:00:05,590 --> 00:00:09,490 لحتى نعزل الجرام negative interest يعني بدنا نعزل 3 00:00:09,490 --> 00:00:14,610 الـ coliform يعني بدنا نمي الجرام negative و بتعمل 4 00:00:14,610 --> 00:00:18,610 inhibition للجرام positive تُعتبر هي ال media 5 00:00:18,610 --> 00:00:22,510 selective and differential media selective يعني 6 00:00:22,510 --> 00:00:27,200 انتقائيةبتنمي نوع وبتعمل inhibition لباقي الأنواع 7 00:00:27,200 --> 00:00:30,600 differential بتميز بين الأنواع اللي راح تنمو على 8 00:00:30,600 --> 00:00:36,280 الطبق selective الـ Gram-positive بكتيريا are 9 00:00:36,280 --> 00:00:39,540 inhibited by the presence of يعني الـ selective 10 00:00:39,540 --> 00:00:43,680 agent فيها هي الـ bile salt والكريستال فيولد 11 00:00:43,680 --> 00:00:47,400 بيعملوا inhibition للـ Gram-positive بكتيريا 12 00:00:47,400 --> 00:00:51,580 فبالتالي معظم الـ Gram-negative بكتيريا will grow 13 00:00:52,280 --> 00:00:55,720 طيب الـ differential agent اللي فيها اللي بيميز من 14 00:00:55,720 --> 00:00:58,980 الـ gram positive اللي راحته المعلق الطبق هو 15 00:00:58,980 --> 00:01:02,780 اللاكتوز أنا بحكي عن ميدية الما كونك لسه قبل ليسر 16 00:01:02,780 --> 00:01:06,760 عليها أي تعديل فيها سكر اللاكتوز، هذا يعتبر كـ 17 00:01:06,760 --> 00:01:10,480 differential agent بيميزها إلى lactose fermenter و 18 00:01:10,480 --> 00:01:15,040 non-lactose fermenter تختار بين الـ gram-negative 19 00:01:15,040 --> 00:01:21,570 بكتيريا باستخدام قهوة اللاكتوز اللاكتوزالكوليفارم 20 00:01:21,570 --> 00:01:25,550 بصلاي ي produce acid from lactose fermentation 21 00:01:25,550 --> 00:01:29,710 معروف زي ما قلنا في المعمل السابق أنه الكوليفارم 22 00:01:29,710 --> 00:01:33,530 بتعمل fermentation لسكر اللاكتوز بيطلع منه acid 23 00:01:33,530 --> 00:01:39,530 with gas فالكوليفارم بتطلع acid من ال fermentation 24 00:01:39,530 --> 00:01:45,390 للاكتوز فبالتالي الكلنس بتحول لونها إلى لون red 25 00:01:47,590 --> 00:01:51,950 وقلنا إن الـ pH Indicator فيه المكونكي اسمه الـ 26 00:01:51,950 --> 00:01:57,730 neutral red الشريشة كولاي produces even greater 27 00:01:57,730 --> 00:02:02,480 quantities of acid الشريشة كولايأكتر واحدة من 28 00:02:02,480 --> 00:02:05,880 الكوليفورم بتطلع كمية أسد من ال fermentation 29 00:02:05,880 --> 00:02:10,300 لالكتوز فبالتالي بالإضافة أنه بغير لون الكولونز 30 00:02:10,300 --> 00:02:14,020 إلى لون أحمر برضه هيغير لون ال media إلى لون أحمر 31 00:02:14,020 --> 00:02:17,640 Causing the surrounding medium and the colonists 32 00:02:17,640 --> 00:02:23,090 to turn redNon-coliform Bacilli don't ferment 33 00:02:23,090 --> 00:02:27,130 lactose اللي ما بتعمل fermentation للاكتوز لكنها 34 00:02:27,130 --> 00:02:31,310 إجرام نيجاتيف بظهر لونها إما uncolored يعني 35 00:02:31,310 --> 00:02:36,210 colorless أو بيكون transparent on مكونكي وممكن 36 00:02:36,210 --> 00:02:41,160 كمان يكون لونها لون أصفرThe gram-positive bacteria 37 00:02:41,160 --> 00:02:44,400 don't die on this media احنا قلنا إنه الـ 38 00:02:44,400 --> 00:02:48,320 selective agent اللي بالميديا بتعمل inhibition للـ 39 00:02:48,320 --> 00:02:53,100 gram-positive ما بتعملها killing وما بتموتها فقط 40 00:02:53,100 --> 00:02:56,940 inhibition يعني تثبيت their growth is just 41 00:02:56,940 --> 00:03:02,680 inhibited هي عند ميديا الماكونك أجار الاشريشا 42 00:03:02,680 --> 00:03:07,260 كولاي تعتبر من ضمن الـ gram نيجاتيف يعني هتنمو على 43 00:03:07,260 --> 00:03:13,060 الطبقلكن معروف إن الاشريشا كولاي من ضمن الكوليفورم 44 00:03:13,060 --> 00:03:16,360 بتعمل fermentation لالكوليفورم اللكتوز وقلنا إن 45 00:03:16,360 --> 00:03:21,480 الاشريشا كولاي بتطلع كمية أسد كتيرة فبالتالي بتغير 46 00:03:21,480 --> 00:03:26,020 لون الكولنز والميديا إلى لون أحمر الـ Enterobacter 47 00:03:26,020 --> 00:03:30,520 aerogenes هاي برضه من ضمن الكوليفورم فبتعمل 48 00:03:30,520 --> 00:03:34,500 fermentation لسكر اللكتوز بيطلع منه أسد وبتكون لون 49 00:03:34,500 --> 00:03:39,160 الكولنز لون أحمرلبروتياس vulgaris لبروتياس من ضمن 50 00:03:39,160 --> 00:03:44,120 عائلة الانتيرو بكترياسي إجرام نيجاتيف لكنها non 51 00:03:44,120 --> 00:03:47,620 -lactose fermenter بتنمو على الطبق لإنها إجرام 52 00:03:47,620 --> 00:03:51,380 نيجاتيف لكنها ما بتعمل fermentation لسكر اللكتوز 53 00:03:51,380 --> 00:03:56,700 فبيكون لونها لون أصفر أو transparent Salmonella 54 00:03:56,700 --> 00:04:01,570 typhimurium نفس قصة لبروتياسNon-Lactose Fermenter 55 00:04:01,570 --> 00:04:04,910 الاستفيلة الككاس Oreous هي من ضمن الـ Ground 56 00:04:04,910 --> 00:04:07,790 Positive وإحنا قلنا إن ال Media هي بتعمل 57 00:04:07,790 --> 00:04:10,690 Inhibition لـ Ground Positive يعني مش هيصير فيها 58 00:04:10,690 --> 00:04:17,740 نمو خالص نجعل السوربيتول مكنكي أجار أسمكMajority 59 00:04:17,740 --> 00:04:23,220 of Escherichia coli O157H7 don't ferment sorbitol 60 00:04:23,220 --> 00:04:28,160 لاحظوا مكتوب كلمة majority يعني غالبية الـ O157H7 61 00:04:28,160 --> 00:04:31,680 ما بتعمل fermentation يعني ممكن في أنواعها تعمل 62 00:04:31,680 --> 00:04:37,420 fermentation للـ sorbitolلكن الـ Fecal Escherichia 63 00:04:37,420 --> 00:04:40,680 coli يعني الـ Escherichia coli اللي بتكون من ضمن 64 00:04:40,680 --> 00:04:44,300 الـ Fecal Coliform اللي احنا ابنا عارفها بتعمل 65 00:04:44,300 --> 00:04:47,180 fermentation للـ Sorbitol لكن غالبية الـ 66 00:04:47,180 --> 00:04:52,000 Escherichia coli O157S7 ما بتعمل fermentation للـ 67 00:04:52,000 --> 00:04:55,960 Sorbitol إيش صار في modification على ميديا 68 00:04:55,960 --> 00:04:59,450 المكونكي اللي حتى صار اسمها أسمك؟أول حاجة 69 00:04:59,450 --> 00:05:03,650 استبدالنا سكر اللكتوز بسكر السوربيتول تاني شغلة 70 00:05:03,650 --> 00:05:07,370 supplemented with cefixime and telluride الـ 71 00:05:07,370 --> 00:05:10,770 Cefixime هاد نوع من الـ antibiotic بعمل inhibition 72 00:05:10,770 --> 00:05:15,020 لليكرام positive الـ Tellurideهاد selective agent 73 00:05:15,020 --> 00:05:19,560 لإتنين شو بيعملوا suppress other sorbitol non 74 00:05:19,560 --> 00:05:24,760 -fermenting organism بيعملوا inhibition لبكتيريات 75 00:05:24,760 --> 00:05:29,980 غير ال O157H7 اللي مابتعمل fermentation لسكر ال 76 00:05:29,980 --> 00:05:36,260 sorbitol يعني بس بدها تنمو على الطبق ال O157H7 77 00:05:38,140 --> 00:05:44,300 Most non-O157 serotyping Escherichia coli ferment 78 00:05:44,300 --> 00:05:50,140 sorbitol المقصود فيها إنه Escherichia coli أنواع 79 00:05:50,140 --> 00:05:54,720 أخرى أو strains أخرى غير الـ O157H7 هتعمل 80 00:05:54,720 --> 00:06:00,640 fermentation للسوربيتول فقط الـ O157H7 هي الماب 81 00:06:00,640 --> 00:06:03,740 تعمل fermentation للسوربيتول من ضمن Escherichia 82 00:06:03,740 --> 00:06:04,160 coli 83 00:06:07,100 --> 00:06:10,620 المخطط هاد بيميّلّي كيف لما بدي أعمل isolation 84 00:06:10,620 --> 00:06:16,180 للإشاريشة coli O157H7 أول يوم بدي أعمل ال primary 85 00:06:16,180 --> 00:06:21,560 enrichment بحط 25 جرام أو 25 مل من ال sample بحط 86 00:06:21,560 --> 00:06:26,400 عليها 225 مل من enrichment media ولتكن مثلا 87 00:06:26,400 --> 00:06:30,600 لتريبتكسوي بروث بعد هيك بسمحلهم فترة incubation 88 00:06:30,600 --> 00:06:36,390 على درجة حرارة 42 سيليزيوس لمدة 24 ساعةبعد هيك 89 00:06:36,390 --> 00:06:41,910 بروح أزرع على ميديا أجار ممكن أزرع على الأسماك أو 90 00:06:41,910 --> 00:06:45,350 ممكن أزرع في ميديا تانية اسمها الفلورو أوكالت 91 00:06:45,350 --> 00:06:49,790 الشريشا كولاي O157 أجار هي ميديا بأزرع عليها 92 00:06:49,790 --> 00:06:53,210 بعملها incubation وبعد هيك بعرضها ل ال UV وبقى 93 00:06:53,210 --> 00:06:57,890 أشوف ال fluorescent معناته نامية O157007 بعد هيك 94 00:06:57,890 --> 00:07:01,070 بعمل ال biochemical test الفحوصات التأكيدية 95 00:07:01,070 --> 00:07:06,240 والتعريفيةباخد مين بالظبط اللي على ميديا الأسماك 96 00:07:06,240 --> 00:07:09,720 باخد الـ Qness اللي لونها colorless بروح بعمل 97 00:07:09,720 --> 00:07:13,760 عليها ال biochemical test والسيرولوجيا نيجي على 98 00:07:13,760 --> 00:07:18,040 كمان ميديا تانية اسمها لـ Chrome Agar وهي مخصصة 99 00:07:18,040 --> 00:07:23,420 للإشاري شكولاي O157S7الـ Media High بيكون فيها 100 00:07:23,420 --> 00:07:27,460 chromogenic mixture ماحد بيعرف شو في مكوناتها إلا 101 00:07:27,460 --> 00:07:31,480 الشركة المصنعة بحيث إن هي يعني اللي تتحكم بالسعر 102 00:07:31,480 --> 00:07:37,500 لإلها يعني من باب الاحتكار تعتبر high rapid and 103 00:07:37,500 --> 00:07:40,060 reliable detection of enterohemorrhagic 104 00:07:40,060 --> 00:07:44,860 Escherichia coli O157 طريقة سريعة ومعتمدة للكشف عن 105 00:07:44,860 --> 00:07:49,660 الـ O157F7Easily distinguishable colors due to 106 00:07:49,660 --> 00:07:53,360 purple color link they have acquired بسهولة بقدر 107 00:07:53,360 --> 00:07:58,340 أميز الإشارة شكولاي O157H7 على ال media high ليش؟ 108 00:07:58,340 --> 00:08:02,880 لأن لونها بيكون بيربولmost other bacterial species 109 00:08:02,880 --> 00:08:06,560 are inhibited باقي أنواع البكتيريا بيصيرها 110 00:08:06,560 --> 00:08:11,420 inhibition أو لو نمت على لكروم أجار بيكون لونها 111 00:08:11,420 --> 00:08:15,240 blue or colorless يعني لو لما نشوف لون purple 112 00:08:15,240 --> 00:08:21,870 معناته هاي إشريشة كلها IO157R7أما لو كان الأزرق أو 113 00:08:21,870 --> 00:08:25,490 colorless معناته هاد نوع تان من البكتيريا other 114 00:08:25,490 --> 00:08:30,090 than Escherichia coli O157-H7 despite specificity 115 00:08:30,090 --> 00:08:33,470 is improved in comparison to Sorbitol-Maconchiagar 116 00:08:33,470 --> 00:08:38,010 بالرغم إن صارت فيها الخصوصية أعلى واتطورت عن 117 00:08:38,010 --> 00:08:42,550 الخصوصية اللي في ميديا الأسماء طيب إيش المقصود بال 118 00:08:42,550 --> 00:08:46,230 specificity أساسا؟الـ specificity يعني لما يطلع 119 00:08:46,230 --> 00:08:49,890 لون purple هات معناته الـ purple ناتج من بكتيريا 120 00:08:49,890 --> 00:08:54,990 أشريشيا كولاي O157A7 يعني بتخصص اللي بدنا إياها 121 00:08:54,990 --> 00:09:00,710 طيبWhen direct isolation method is used, the false 122 00:09:00,710 --> 00:09:03,910 positive must be screened out by additional tests 123 00:09:03,910 --> 00:09:07,470 مع إنه إلها specificity عالية، لاحظوا إنه ممكن 124 00:09:07,470 --> 00:09:12,990 اللون البربل يطلع مش بس الشريشة كولاي O157، ممكن 125 00:09:12,990 --> 00:09:16,610 أنواع تانية من البكتيريا على هذه الميديا بتعطي لون 126 00:09:16,610 --> 00:09:20,610 بربلفهم عاد كيف عرفوا هيك أنهم عملوا biochemical 127 00:09:20,610 --> 00:09:26,350 test أو additional test تمام الشريحة coli O157 على 128 00:09:26,350 --> 00:09:29,490 ميدة الكروم أجار بيكون لونها purple other 129 00:09:29,490 --> 00:09:33,050 bacterial colonies inhibited أو بيكون لونها ابلو 130 00:09:33,050 --> 00:09:38,480 أو لونها بيكون colorlessالكولونيز تظهر كبنك على 131 00:09:38,480 --> 00:09:45,100 كروم أجار بنك أو موف أو purple هيكلها ألوان لـ 132 00:09:45,100 --> 00:09:50,420 O157 على ميديت الكروم أجار بعد انقباش بعد ما أعمل 133 00:09:50,420 --> 00:09:55,700 انقباش من 16 إلى 24 ساعات على درجة حرس 7 أو 30 134 00:09:55,700 --> 00:09:59,220 سليسيا البرنامج يجب أن يتعامل على ممكنة كولونيز 135 00:09:59,220 --> 00:10:06,820 O157 التي ليسوا أسماك لو بدي أشتغل على ميديتلسمك 136 00:10:06,820 --> 00:10:13,560 هتكون الـ O157 لونها colorless ممكن هتكون لونها 137 00:10:13,560 --> 00:10:22,300 موف أو pink على لكروم أجار لو بكتيريا تانية غير 138 00:10:22,300 --> 00:10:26,340 الـ O157 على ميديا لكروم أجار هيكون لونها أزرق أو 139 00:10:26,340 --> 00:10:30,940 colorlessالـ Latex Agglutination Test had من ضمن 140 00:10:30,940 --> 00:10:34,380 السيرولوجيا أنتجين أنتبادري أكشن to identify 141 00:10:34,380 --> 00:10:37,700 Escherichia coli O157, a portion of a well 142 00:10:37,700 --> 00:10:42,500 -isolated colony باخد كولونيه should be selected 143 00:10:42,500 --> 00:10:47,300 from the culture plateيعني لو كنت أنا أمنمياها على 144 00:10:47,300 --> 00:10:50,640 ميديا الأسماك بعناته بدي أخد الـKeyonese اللي 145 00:10:50,640 --> 00:10:54,280 لونها colorless لو كنت أمنمياها على ميديا لـChrome 146 00:10:54,280 --> 00:10:57,940 Agar بدي أخد الـKeyonese اللي لونها purple بعد هيك 147 00:10:57,940 --> 00:11:01,980 بدي أتأكد من خلال Astrology و الـBiochemical Test 148 00:11:01,980 --> 00:11:05,120 طب بالنسبة للـAstrology شو بعمل؟ باخد مسحة من 149 00:11:05,120 --> 00:11:12,440 البكتيريا بحط عليها O157 Antisera أو باخد مسحة من 150 00:11:12,440 --> 00:11:17,950 البكتيريا بحط عليهاH7 Antisera وبعملهم mix وبشوف 151 00:11:17,950 --> 00:11:22,510 وين صار فيه agglutination لاحظوا عندكم بالرسمة في 152 00:11:22,510 --> 00:11:27,930 الصف اللي تحت بظهر زي حبات الرمل او يعني بتكون زي 153 00:11:27,930 --> 00:11:34,670 particles exactly زي في حالة ال blood group طيب 154 00:11:34,670 --> 00:11:39,120 بعد هيك بدنا نعمل ال biochemicalTest فحوصات 155 00:11:39,120 --> 00:11:44,040 تعريفية للبكتيريا الفكرة أنه بعد ما أكون زارعة على 156 00:11:44,040 --> 00:11:49,020 media selective زي مثلا الأسماك أو لكروم أجار 157 00:11:49,020 --> 00:11:52,420 فالأسماك بروح أاخد البكتيريا اللي لونها بيكون 158 00:11:52,420 --> 00:11:56,000 colorless أو لو كنت زارعة على لكروم أجار باخد 159 00:11:56,000 --> 00:11:59,240 البكتيريا اللي لونها pink أو mauve أو purple بجري 160 00:11:59,240 --> 00:12:03,240 عليها الفحوصات التأكيديةبس قبل أن أعمل فحوصات 161 00:12:03,240 --> 00:12:07,160 تأكيدية لازم تكون البكتيريا نامي على general media 162 00:12:07,160 --> 00:12:12,080 general media يعني media non selective بروح أزرع 163 00:12:12,080 --> 00:12:17,680 البكتيريا على ال triptych soy agar هذه media 164 00:12:17,680 --> 00:12:21,460 general non selective media أو ممكن heart infusion 165 00:12:21,460 --> 00:12:30,150 agar أو ال blood agar تمام بعد ما بزرحهمبروح أخد 166 00:12:30,150 --> 00:12:33,750 منهم، بروح أعمل عليهم الـ Biochemical Test من ضمن 167 00:12:33,750 --> 00:12:38,190 الفحوصات اللي بأشتغلهم زي ال «INVEC» اختصار للـ 168 00:12:38,190 --> 00:12:44,110 Indole Methyrid-Vagasproskler-Citrate فطالما الـ 169 00:12:44,110 --> 00:12:49,170 O157H7 من ضمن الاشريشة كلها فهتكون النتيجة 170 00:12:49,170 --> 00:12:50,970 Positive Positive Negative Negative